| 一、细胞基本属性 |
| 细胞名称 | 昆虫卵巢细胞 |
| 细胞别称 | SF9; sf9; SF-9; Sf-9; sf-9; Sf 9; Spodoptera frugiperda clone 9; Sf clone 9; IPLB-Sf-9AE; IPLB-SF-9AE; IPLB-SF-9; IPLB-Sf-9; IPLB-Sf9 |
| 细胞货号 | SNL-170 |
| 细胞种属 | 草地贪夜蛾 |
| 生长情况 | 半贴壁 |
| 培养条件 | Grace’s Insect Medium+10%FBS+1%双抗 |
| 培养环境 | air, *；28℃ |
| 二、细胞培养操作 |
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.轻轻吸走培养上清，留2-3ml培养基轻轻吹打细胞面吹下细胞；
2.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清；
3.加新的*培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
4.补足*培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 半贴壁细胞会附着瓶底，但贴壁不紧，轻轻吸取培养基轻轻吹打细胞面就会脱落，不需要胰酶消化。建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
| 三、细胞冻存操作 |
| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手*)或92%*培养基+8%DMSO(高手*); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
Tips：
1.细胞半贴壁圆形或多角形生长，部分悬浮圆形，传代时均可收集培养，换液时将悬浮细胞离心收集后重新接回原瓶，若贴壁细胞较多活性较好时可以不要悬浮的细胞；
2.该细胞对胰酶比较敏感，胰酶消化后细胞形态会更多梭形，贴壁变紧，传代不建议使用胰酶消化该细胞；
3.该细胞28度培养，建议27.5-28度之间，超过28度细胞状态会受损无法恢复，低于27度细胞生长速度会变慢，但恢复温度后可以恢复生长。
我们*使用尚恩生物SF9（昆虫卵巢细胞）zuan用*培养基（产品货号：SNLM-170）作为体外培养SF9（昆虫卵巢细胞）的培养基。
