在分子生物学研究中，有很多实验需要获得目的基因的序列进而确定基因的表达水平，这就需要得到样品中高质量、高纯度的RNA，本文就RNA提取的原理、方法进行总结，并提供了不同类型样品RNA提取的推荐试剂盒。

RNA提取的基本原理

裂解过程：高浓度蛋白质变性剂的裂解方法，是抽提RNA的第一方案。

总RNA的抽提，最重要的是快速裂解细胞膜，而在DNA提取过程中存在的基因组与蛋白质“缠”住的问题，并不会对后续的纯化过程产生大的影响，可以不考虑。

高浓度蛋白质变性剂能快速破坏细胞膜，进而迅速抑制住细胞内的RNA酶，从而保证了RNA的完整性，绝大部分样品的RNA抽提方法，都是以高浓度的蛋白质变性剂为基础的。

Trizol方法

常用的RNA提取方法是Trizol方法。Trizol内含异硫氰酸胍能迅速破碎细胞，同时使核蛋白复合体中的蛋白变性并释放出核酸，由于释放出的DNA和RNA在特定pH值下的溶解度不同，且分别位于中间相和水相，从而使DNA和RNA得到分离，取出水相后，通过有机溶剂  () 抽提及异丙醇沉淀，可得到纯净RNA。

Trizol方法的提取过程：

1. 取离心管做好标记，将一定量的待提取样品应用液氮研磨成粉末状；

2. 加入1mL的Trizol，漩涡混匀，室温静置5min。
一定要将材料研磨充分，且一旦研磨完毕立刻加入Trizol混匀；

3. 加入200µL，上下颠倒15s，室温静置3min；

4. 12000 r/min 4℃离心15min；

5. 新取一离心管，小心吸取无色上清至该离心管；

样品分三层 (无色上清水相，中间白色层，粉色下层有机相)，

6. 加入等体积异丙醇，轻轻混匀，冰浴10～20min，弃上清；

7. 用1mL 75%的乙醇悬浮沉淀，12000 r/min 4℃离心10min；

8. 弃上清，再短暂离心，沉淀于室温下晾干；

9. 加入30-50µL DEPC处理的水溶解RNA。

注：使用一半异丙醇加一半高盐溶液替代纯粹的异丙醇，可以大大降低多糖残留。