Rtrypsin 重组胰蛋白酶 返回列表页

rTrypsin的应用

• 包括干细胞在内的多种细胞系的细胞解离和增殖

• 疫苗生产加工

• 在细胞固定和分选之前分离切割的细胞•

rTrypsin的优点

• 通过重组生产工艺生产的胰蛋白酶不受动物酶如胰凝乳蛋白酶或羧肽酶的污染。

• 无动物来源（AOF）生产工艺消除了最终产品中病毒和动物相关污染物的风险

• 允许简单替换牛或猪胰蛋白酶

• 稳定性不受Ca2+的影响• 稳定一致的供应

rTrypsin稳定性

• rTrypsin是一种颗粒状产品

• rTrypsin的特殊稳定性使得在细胞培养过程中酶的储存和常规处理变得容易和方便

rTrypsin专一性rTrypsin像天然胰蛋白酶一样在赖氨酸和精氨酸的羧基侧切割肽键。这代表rTrypsin可以简单地替代猪或牛胰蛋白酶rTrypsin 酶特异性在pH 9.0 （Suc-AAPX-pNA）

底物：Suc-AAPA-PNA，Suc-AAPR-PNA，Suc-AAPD-PNA、Suc-AAPIPNA、Suc-aapm-PNA，Suc AAPV-PNA，Suc AAPL-PNA，SucA-APEPNA，SucA-APK-PNA，Suca-AAPF-PNA.

测定缓冲液：100mM琥珀酸，100mM HEPES，100mM CHES，100mMCABS，1mM CaCl2，150mM KCl，0.01%Triton X-100，pH9.0。

测定：20μ 重组胰蛋白酶/猪胰蛋白酶（在0.01%Triton X-100中稀释）与100μl测定缓冲液在微量滴定板孔中混合。

通过加入100μl PNA底物（50mg PNA底物溶解在1.0ml DMSO中，并进一步用0.01%Triton X-100稀释45倍）开始测定。监测OD405的增加作为胰蛋白酶/猪胰蛋白酶活性的量度

rTrypsin用于分离细胞胰蛋白酶可用于来自粘附于培养容器内表面生长的单层的细胞。rTrypsin在干细胞系如IPH和HES以及CHO、Vero和MDCK细胞系上表现良好。最常见的方法是用胰蛋白酶/EDTA/PBS缓冲液（调节至pH 7）处理，将细胞从培养基质中去除。根据细胞系的不同，建议的rTrypsin浓度应调节至0.2 mg/mL（相当于200 U/mL活性为1000 USP/mg粉末的rTrypsin），并进行无菌过滤。