Elisa试剂盒检测原理
2021-01-20标签：检测, 样本, 标准
Elisa生物检测是一种敏感度高，同时特异性强，重复性好的实验检测方法，由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
四种Elisa检测方法由于其检测原理各有优劣：
优点缺点直接法1.操作简便2.消除了二抗交叉反应1.一抗由于添加标签免疫活性降低2.标记一抗耗时且昂贵3.没有产生信号放大间接法1. 一抗的最大免疫反应性得以保留2. 高灵敏度，信号放大1. 二级抗体可能发生交叉反应，产生非特异性信号2. 需要额外的孵育步骤夹心法1.特异性，灵敏度高2.适合复杂的样本1.检测时间，反应时间增加2.步骤繁琐竞争法1. 通过观察预期信号输出中的干扰来测量样本中抗原（或抗体）的浓度。2. 最常用于分析物较小，不能同时跟两种不同的抗体结合。1.计算不太直观2.总体敏感性和特异性较低。
Elisa试剂盒选择原则：
指标选项样本类型人，小鼠，大鼠检测指标的类别·多表位的大蛋白：夹心ELISA·小分子：竞争ELISA检测需求定性或定量灵敏度低浓度的物质需选择高灵敏度检测方式样本体积珍贵的样本用少量的体积回收率和线性·灵敏度·动态范围·标准曲线检测系统比色法，荧光法，发光法其他优势协议简单，操作方便，实验时间短
Elisa试剂盒评价标准：
① 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，应大于等于0.9900。
② 灵敏度：反应试剂盒的最低检测浓度
③ 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
④ 重复性：板内、板间变异系数
⑤ 回收率：判断实验的准确性和特异性
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