人肝细胞生长因子（HGF）ELISA试剂盒测试

人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒测试

小知识：影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。
特点
一、高效、灵敏、特异的抗体；
二、稳定的重复性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
五、节省实验经费。

人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒测试试验原理：
Glucagons试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知Glucagons浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Glucagons和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Glucagons的浓度呈比例关系。

人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒测试试剂盒内容及其配制

试剂盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 即用型
塑料膜板盖 1块 半块 即用型
标准品：400pg/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按说明书进行稀释
空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型
标准品稀释缓冲液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型
生物素标记的抗Glucagons抗体 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型
洗涤缓冲液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml） 按说明书进行稀释
底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
终止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型
标本稀释液 1瓶（12ml） 1瓶（6.0ml） 即用型

自备材料
1． 蒸馏水。
2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3． 振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒测试操作注意事项
1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8． 加入试剂的顺序应*，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒测试

磷钨酸负染色液(2%) · 负染色又称阴性染色,是相对于普通染色(称正染色)而言。 · 染色其他 · 100ml · 室温,避光,12个月 · 染色后的样品图像呈现透明的亮光,而背景图像呈黑色。pH值为6.8-7.0之间。

ELISA包被缓冲液(1×) · ELISA检测,又称为重碳酸盐缓冲液。 · 免疫检测 · 100ml · 4℃,3个月 · 由碳酸盐,叠氮钠等组成,ph为9.6。

中性福尔马林固定液(10%) · 各种组织固定,又称为中性甲醛溶液。 · 固定液 · 500ml · 室温,避光,12个月 · 10%中性福尔马林也称为中性缓冲福尔马林或4%中性甲醛缓冲溶液,主要由甲醛、磷酸盐等组成,pH值7.2-7.4。

盐酸胍溶液(8mol/L) · 提取细胞总RNA实验中的强烈变性剂,使蛋白质变性 · 核酸提取 · 100ml · 室温,18个月 · 主要由盐酸胍、去离子水组成。

MOPS电泳缓冲液(10×,RNase free) · 主要用于RNA电泳 · 核酸电泳 · 500ml · 室温,避光,6个月 · 主要由MOPS、乙酸钠、EDTA、DEPC水等组成,见光易变黄。