齐一生物低氧诱导因子1α(HIF-1α)检测试剂盒 齐一生物科技(上海)有限公司试剂种类众多:覆盖分析化学品,无机化学品,有机化学品,生物化学品,材料化学品.试剂信息齐全:包含试剂特性描述,详细质量信息,应用方法、标准,用途以及正在开发的前沿应用.齐一生物科技(上海)有限公司: 60348496.www.qiyibio。。com
齐一生物低氧诱导因子1α(HIF-1α)检测试剂盒样品处理程序(样品在提取过程中,要严格按说明书操作,提取过程中应准确稀释,否则会出现结果不准确,样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存)
8.1取10g粉碎的样品,加 20ml 70%甲醇溶液
8.2强力振荡3分钟
8.3用Whatman 滤纸过滤
8.4取100μl处理后的样品,加入400μl样本稀释液
8.5取50μl稀释液进行分析(稀释倍数10)
9 酶免分析步骤
9.1 实验须知
9.1.1 实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复室温(25±2℃),时间约2小时。回温室温(25±2℃)后再取出微孔条,多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保证回温充分,否则影响检测的精确度和准确度。
9.1.2 使用后请立即将试剂放回2~8℃保存
9.1.3 请不要改变分析程序
9.1.4 请使用精确的微量移液器
9.1.5 操作一旦开始,请不要中断任何程序
9.1.6 ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序,请严格按照要求操作
9.1.7 为避免交叉污染,每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样
9.1.8 加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面
9.2 分析步骤
9.2.1 预先进行编号,标记B0、标准品和样品的位置,推荐进行双孔检测
9.2.2 取所需数量的微孔(微孔条可拆),将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存
9.2.3 样品稀释液(10×)、浓缩洗涤液(20×)稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)
9.2.4 在B0孔中加入50μl0.0 ng/ ml标准品溶液
9.2.5 在各标准孔中加入50μl的标准品溶液
9.2.6 在各样品孔中加入50μl样品溶液
9.2.7 在所有孔中加入50μl的抗本产品抗体酶结合物
9.2.8 轻轻晃动反应板几秒钟。
9.3 37℃温浴30min (温浴过程中不时轻拍反应板,可以减少双孔误差)
9.3.1 甩掉孔中液体,用洗液洗涤微孔板5次,zui后一次应在吸水纸上拍打以*除去孔中液体。
9.4 反应
9.4.1 洗涤程序完成后,立即用微量移液器在每个微孔中先加入50μl显色液A,再加 50μl显色液B;轻微晃动反应板使之*混匀
9.4.2 37℃温浴10min
9.4.3 每孔中加入50μl终止液,混匀
9.4.4 在450nm下检测吸光度,结果在5min内读取。HPTS [8-Hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid, trisodium salt] 8-羟基芘-1,3,6-三磺酸三钠盐 1 g 6358-69-6
5-(and-6)-Carboxy-2',7'-dichlorofluorescein *Mixed isomers* 5-(6)-羧基-2',7'-二氯荧光素(混合物) 100 mg 111843-78-8
BCECF acid [2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein] *mixed isomers* 2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素(混合物) 1 mg 85138-49-4
BCECF, AM [2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein, acetoxymethyl ester] 2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素乙酰甲酯 1 mg 117464-70-7
BCECF, AM [2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein, acetoxymethyl ester] *5mM solution in anhydrous DMSO* 2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素乙酰甲酯(5mM 无水DMSO溶液) 50 μL 117464-70-7
5-(and-6)-Carboxy SNARF-1 5(6)-羧基SNARF-1 1 mg 126208-12-6
5-(and-6)-Carboxy SNARF-1, Acetoxymethyl Ester, Acetate 5(6)-羧基SNARF-1, 乙酰甲酯, 乙酸酯 1 mg 126208-13-7
5-(and-6)-Carboxy SNARF-1, Acetoxymethyl Ester, Acetate *5mM solution in anhydrous DMSO* 5(6)-羧基SNARF-1, 乙酰甲酯, 乙酸酯(5mM 无水DMSO溶液) 50 μL 126208-13-7
BAPTA, AM 胞内钙掩蔽BAPTA, AM 25 mg 126150-97-8
BAPTA, tetrapotassium salt BAPTA 四钾盐 1 g
BAPTA, tetrasodium salt BAPTA 四钠盐 1 g
EGTA tetrasodium salt EGTA 四钠盐 1 g
Quin-2, AM 胞内钙掩蔽Quin-2, AM 5 mg 83104-85-2
Quin-2, tetrapotassium salt Quin-2 四钾盐 5 mg
Fluo-3, AM 钙荧光探针Fluo-3, AM 100 μg 121714-22-5
Fluo-3, AM 钙荧光探针Fluo-3, AM 1 mg 121714-22-5
Fluo-3, AM 钙荧光探针Fluo-3, AM 10×100 μg 121714-22-5
MEQ [6-Methoxy-N-ethylquinolinium iodide] MEQ 100 mg 34373-76-7
SPQ [6-Methoxy-N-(3-sulfopropyl)quinolinium] SPQ 50 mg
MQAE [N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide] MQAE 100 mg
Lucigenin [Bis-N-methylacridinium nitrate] N,N二甲基二吖啶硝酸盐;光泽精 10 mg 2315-97-1
TSQ [N-(6-Methoxy-8-quinolyl)-p-toluenesulfonamide] TSQ 25 mg
Calcein 钙黄绿素;二[N,N-二羧甲基氨甲基]荧光素 10 mg 1461-15-0
Calcein blue 钙黄绿素蓝;8-[N,N-二(羧甲基)氨甲基]-4-甲基伞形酮 25 mg 54375-47-2
DiBAC4(5) [Bis-(1,3-dibutylbarbituric acid)pentamethine oxonol] DiBAC4(5) 25 mg 63560-89-4
DiBAC4(3) [Bis-(1,3-dibutylbarbituric acid)trimethine oxonol] DiBAC4(3) 25 mg 70363-83-6
DiSBAC2(5) [Bis-(1,3-diethylthiobarbituric acid)pentamethine oxonol] DiSBAC2(5) 25 mg
DiSBAC2(3) [Bis-(1,3-diethylthiobarbituric acid)trimethine oxonol] DiSBAC2(3) 25 mg
Oxonol V [Bis-(3-phenyl-5-oxoisoxazol-4-yl)pentamethine oxonol] Oxonol V 25 mg 61389-30-8
Oxonol VI [Bis-(3-propyl-5-oxoisoxazol-4-yl)pentamethine oxonol] Oxonol VI 25 mg 64724-75-0