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胎牛血清主要成分、鉴别方式及灭活介绍

来源:天津天正信达生物科技有限公司   2025年03月18日 10:48  

  胎牛血清主要成分、鉴别方式及灭活介绍


  胎牛血清主要成分

  胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是一种复杂的生物制品,其主要成分包括:

  ‌蛋白质‌:如白蛋白、球蛋白、纤连蛋白、转铁蛋白等‌。

  ‌生长因子‌:包括多种促进细胞生长和增殖的因子‌。

  ‌激素‌:如胰岛素、促生长激素、氢化可的松等‌。

  ‌微量元素和维生素‌:如氨基酸、糖类、脂类等‌。

  ‌其他不明成分‌:由于胎牛血清是天然生物制品,其中可能存在部分尚未明确的生物成分‌。

  胎牛血清的鉴别方式

  ‌外观与颜色‌:

  高质量胎牛血清通常呈现清澈透明或略带黄色的状态‌。

  国产血清多呈蜡黄色,进口血清则可能呈现淡黄、微红或橘红色‌。

  ‌血红蛋白含量‌:

  我国标准规定血红蛋白含量不高于20mg/dl,高质量血清的溶血现象较少‌。

  ‌蛋白质含量‌:

  胎牛血清的蛋白质含量通常在3.5%~5.0%(w/v)之间‌。

  ‌无菌与支原体检验‌:

  高质量血清应通过无菌检验和支原体检验,结果为阴性‌。

  ‌细菌内毒素‌:

  细菌内毒素含量应≤5(EU/ml)‌。

  ‌病毒检测‌:

  高质量血清应通过牛腹泻病毒和大肠杆菌噬菌体检测,结果为阴性‌。

  ‌细胞增殖支持能力‌:

  高质量血清应支持细胞增殖,最大增殖浓度≥2.5×10⁶个/ml,细胞倍增时间≤15h,克隆率≥85%‌。

  通过以上成分分析和鉴别方式,可以有效判断胎牛血清的质量和适用性‌。

  胎牛血清是否要灭活?

  胎牛血清是否需要灭活取决于具体的实验需求。以下是关于胎牛血清灭活的相关信息:

  1. ‌灭活的目的‌

  灭活的主要目的是去除血清中的补体活性,补体是一组参与免疫反应的蛋白质,在某些实验中可能会引起细胞裂解或干扰实验结果‌。

  灭活还可以减少批次间的变异性,并避免在某些细胞培养或病毒学实验中的非特异性反应‌。

  2. ‌灭活的操作‌

  灭活通常通过将胎牛血清加热至56°C并保持30分钟来完成。

  操作时需确保水浴温度稳定,并缓慢旋转血清瓶以保证均匀加热,灭活后迅速冷却至4°C并分装保存‌。

  3. ‌是否需要灭活‌

  ‌不需要灭活的情况‌:

  常规细胞培养中,大多数细胞系在使用未灭活的血清时表现良好‌。

  如果实验不涉及免疫反应或补体敏感的细胞,通常无需灭活‌。

  ‌需要灭活的情况‌:

  在免疫学研究中,或对补体敏感的细胞类型(如ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞)时,推荐使用热灭活血清。

  研究或疫苗开发中,灭活可能有助于减少非特异性反应。

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