小鼠簇集蛋白（clu）ELISA试剂盒

上海笃玛生物科技有限公司代理的品牌：试剂：Sigma、TCI、Amresco、Aldrich、Fluka、MERCK、Roche
生物试剂及耗材：R&D、Abcam、santan cruz、CST、 Cayman、ClioCell、Gibco、Invitrogen、Axygen、Costar、Gilson、Eppendorf、Nichipet、Dragonmed、GE Healthcare等

笃玛主要经营：ELISA试剂盒，标准品，抑制剂，染液，抗体等。

笃玛生物外包实验免疫组化、TUNEL（凋亡）实验、原位杂交实验、HE染色、特殊染色、免疫印迹（WB），免费代测ELISA实验

产品名称:小鼠簇集蛋白(clu)ELISA试剂盒
英文名称：Mouse Clusterin(CLU) ELISA kit
公司：http://www.dumabio。。ｃｏｍ 
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小鼠簇集蛋白(clu)ELISA试剂盒规格：96T/48T 中英文双版说明书 提供代测 含税含运费
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：2-8℃。
2．有效期：6个月
运输条件：低温运输，用干冰或者冰袋低温运输。
笃玛生物供应的种属：人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物elisa试剂盒等
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本

小鼠簇集蛋白(clu)ELISA试剂盒试剂盒组成及试剂配制
1、 酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、 辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、 浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、 终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

试剂盒组成
1 酶标包被板 96 孔*1 可拆卸板
2 酶结合物 6ml*1 瓶
3 标准品 1ml*6 瓶
4 显色剂 A 液 6ml*1 瓶
5 显色剂 B 液 6ml*1 瓶
6 终止液 6ml*1 瓶
7 浓缩洗涤液（*100） 50ml*1 瓶
8 封板膜 1 张
9 使用说明书 1 份
备注 1.标准品 1～6 的浓度分别为：0, 250, 500, 1000, 2500, 5000μmol/L

 
小鼠簇集蛋白(clu)ELISA试剂盒操作步骤
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.        依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.        用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后立即进行检测。
 
注：小鼠簇集蛋白(clu)ELISA试剂盒
1.  试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，*个孔与zui后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的 “预孵育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间（包括标准品及所有样品）控制在10分钟内，如标本数量多，*使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响zui后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请精确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置（如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl），以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如，每隔10分钟），如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请zui后乘以稀释倍数。
 
洗板方法
1.  手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将*的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
2.  自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
 
特异性
    本试剂盒可同时检测重组或天然的人EGFR，且与其它相关蛋白无交叉反应。
 
计算
  以标准物的浓度为纵坐标（对数坐标），OD值为横坐标（对数坐标），在对数坐标纸上绘出标准曲线。*使用专业制作曲线软件进行分析，如curve expert 1.3，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

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