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BD 559763 Annexin V PE Apoptosis kit 细胞凋亡早期检测试剂盒 1

参考价面议
具体成交价以合同协议为准
  • 公司名称上海雷浩信息科技有限公司
  • 品       牌
  • 型       号
  • 所  在  地上海
  • 厂商性质经销商
  • 更新时间2016/8/24 14:12:51
  • 访问次数2497
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上海雷浩信息科技有限公司,是一家专注于生命科学和生物技术领域的高科技企业,专业提供分子生物学、免疫学、生命科学基础研究诸多领域的试剂产品及生物技术服务.公司注重跟踪世界范围分子生物学、细胞生物学等生物学科的发展前沿,努力将欧美专业生产厂家的具有*水平的产品*给各类研究人员。公司客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。公司拥有sigma试剂,BD流式抗体,abcam和santacuz抗体,Abnova重组蛋白、抗体以及RNAi,Cayman的生化和免疫类产品,eBioscence的流式抗体和试剂盒,Prospec和Peprotech细胞因子,Toyobo和部分国产分子系列等多种优势科研试剂,产品质量保证,*,欢迎各位新老顾客前来光临。公司在重视产品质量的同时,也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门的*的服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户。

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品牌:BD
数量:100
规格:100T
BD 559763 Annexin V PE Apoptosis kit 细胞凋亡早期检测试剂盒 1 产品信息
品牌:BD
数量:100
规格:100T

凋亡检测操作流程
 
一、Annexin V 检测凋亡细胞膜的改变
 
试剂及溶液:
 
A.对于单独购买的试剂:
 
a) 10X Binding Buffer (货号:556454):0.1 M HEPES,pH 7.4;1.4 M NaCl;25 mM CaCl 2。使用前稀
释至 1X。
 
b) Propidium Iodide(PI,货号:556463):建议与以下试剂同时使用 Annexin V-FITC(货号: 556420,
556419)或 Annexin V-Biotin (货号: 556418,556417)
 
c) Via-Probe™ (货号:555816 ):核酸染料 7-AAD。建议与以下试剂同时使用 Annexin V-PE(货号:
556422,556421)或 Annexin V-Biotin(货号:556418,556417)。
 
d) 1X PBS Buffer (货号: 554781):8 g NaCl, 0.2 g KCl, 1.44 g Na2HPO 4 · 7H20, 0.24 g KH2PO4 , 加水至
1L。调整 pH 值至 7.2。 高压灭菌室温保存。
 
B.对于凋亡检测试剂盒(货号:556547
 
a)  FITC Annexin V (组分编号: 51-65874X):每个样本 5 μl 用量。
 
b)  Propidium Iodide (PI,组分编号: 51-66211E)):现成的核酸染料。每个样本 5 μl 用量。
 
c)  10X Annexin V Binding Buffer(组分编号: 51-66121E): 0.1 M Hepes/NaOH (pH 7.4), 1.4 M NaCl,
25 mM CaCl2.使用时用双蒸水配制成 1X。
 
操作步骤:
 
1.取 Falcon 试管,按标本顺序编好阴性对照管和标本管号。
 
2.使用冷的 PBS 缓冲液洗细胞两次,再用 1´ Binding Buffer 缓冲液制成 1´106 细胞/ml 的悬液。
 
3. Falcon 试管中加入 100 µl 细胞悬液。
 
4.按以下体积加入 Annexin V 与核酸染料:
 
管号          名称            荧光标记 Annexin V            核酸染料:
1           阴性对照                 -                         -
2            单阳 1               AV-FITC                      -

3            单阳 2                  -                         PI
4            样本                 AV-FITC                      PI

 

5.轻轻混匀,室温(20°C ~25°C)避光处放置 15 分钟。
 
6. *使用 Annexin V-Biotin 试剂进行检测时:
 
h  1´Binding Buffer缓冲液洗细胞一次,去上清。
 
h  1´Binding Buffer缓冲液100µl溶解SAv-FITC试剂0.5µg,加入到细胞管中。
 
h 轻轻混匀。加入5µl PI,室温(20-25°C)避光处放置15分钟。
 
7.各试验管中分别加入 1´Binding Buffer 缓冲液 400µl。1 小时内上流式细胞仪测定结果。

Annexin V Blocking 
 
待测细胞与未标记的重组 Annexin V 预孵育,然后进行实验,是 Annexin V 细胞凋亡检测的质量控制。
原理是预先阻断 Annexin V-FITC 的结合位点,这样可以证明 Annexin V-FITC 凋亡分析的特异性。
 
1.  使用冷的PBS缓冲液洗细胞两次,再用1´Binding Buffer缓冲液制成1´106细胞/ml的悬液。
 
2.  在5ml的培养管中加入100µl细胞悬液(约1´105个细胞)。
 
3.  加入5-15µg纯化的重组Annexin V。注意,不同的细胞系,以及凋亡的不同阶段,其Annexin V位点
饱和所需要的纯化的重组Annexin V含量不同。某些情况下,为达到效果,可以减少细胞数量,
0.5´105个细胞加5-15µg纯化的重组Annexin V。
 
4.  轻轻混匀,室温反应15分钟。
 
5.  加入5µl的Annexin V-FITC或/和PI,轻轻混匀,室温避光处放置15分钟。
 
6.  各试验管中分别加入1´Binding Buffer缓冲液400µl。
 
7.  1小时内上流式细胞仪测定结果。

温馨提示:不可用于临床治疗。

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