D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐*（超纯）
产品名称 | 货号 | 规格 | 保存 | 价格(元) |
D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐*（超纯） | C6301L1330 | 25 mg | 室温 | 750 |
D-Luciferin, Potassium Salt D-荧光素钾盐*（超纯） | C6301L1332 | 100 mg | 室温 | 1050 |
| C6301L1334 | 1 g | 室温 | 3950 |
| C6301L1338 | 5 g | 室温 | 15550 |
产品描述
D-Luciferin Free acid, potassium salt, and sodium salt *UltraPure Grade*D-荧光素（D-Luciferin）是荧光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整个生物技术领域，特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下，荧光素（底物）能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性（见下图）。将携带荧光素酶编码基因（Luc）的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术（BLI）来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。
D-荧光素也常用于体外研究，包括荧光素酶和ATP水平分析；报告基因分析；高通量测序和各种污染检测。目前市场上有三种产品形式，D-荧光素（游离酸），D-荧光素钠盐，以及D-荧光素钾盐。这三种产品主要的差别在于溶解特性上。D-荧光素（游离酸）水溶性以及缓冲体系的溶解性都很弱，除非溶于弱碱如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇（10 mg/ml）和DMSO（50 mg/ml）。但钠盐和钾盐形式的D-荧光素能够非常容易且快速的溶入水或者缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成液体后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。
产品性质
中文别名（Chinese synonym） | D-荧光素钾盐 |
英文别名（English synonym） | (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt; |
CAS号（CAS NO.） | 115144-35-9 |
分子式（Formula） | C11H7N2O3S2 K |
分子量（Molecular weight） | 318.42 g/mol |
外观（Appearance） | 淡黄色粉末 |
溶解性（Solubility） | 溶于水（60 mg/ml） |
纯度（Purity）（HPLC） | ＞99% |
D-荧光素钾盐运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，保质期12个月。
D-荧光素钾盐使用方法
1．体外生物发光检测
1）用蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成100 mM的储存液（200×，浓度30mg/ml）。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。
2）用预热好的组织培养基1:200稀释储存液，配制工作液（终浓度150µg/ml）。
3）去除培养细胞的培养基直至无残留。
4）待图像分析前，向细胞内添加1×荧光素工作液，然后进行图像分析（或者细胞放在37℃短时间孵育后检测可增强信号）。
2． 活体成像分析
1）用无菌的DPBS（w/o Mg2+）配制D-荧光素钾盐工作液（15mg/ml），0.2µm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装于-20℃或-80℃冻存，避免反复冻融。一旦使用，放到4℃解冻，保持冰冷且避光。
2） 注射量取决于注射方式，具体如下：
注射方式 | 剂量 |
静脉注射（25-27gauge针头） | 按10µl/g体重浓度，加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液 |
腹腔注射（25-27gauge针头） | 按10µl /g体重浓度，加入相应体积的15mg/ml荧光素工作液 |
肌肉注射（27gauge针头） | 50µl，浓度为1-2mg/ml荧光素工作液 |
鼻内注射（pipette） | 50µl，浓度为3mg/ml荧光素工作液 |
3） 注射入体内10-20 min（待光信号达到稳定平台期），再进行成像分析。
注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定zui高信号检测时间和信号平台期。
D-荧光素钾盐 注意事项
1) 本品（firefly luciferin）和甲虫荧光素（beetle luciferin）都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid，仅仅是不同公司在命名上的差异。
2) 本品保存和操作的过程中都要避光。另外水溶性储存液过滤除菌后，可以-20℃或-80℃分装冻存，避免反复冻融。如果有条件，对储存液充氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存时间更长，长达1年。
3) 注射方式，动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定*信号平台期和*的检测时间。
4) 荧光素钾盐和荧光素钠盐应用上没有差别，两者的差别在于物理性状上如外形和溶解性。钠盐的水溶性高于钾盐。从目前发表的文献来看，钾盐的使用率远高于钠盐，尤其是体内实验。两者功效相同。
5) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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