Hoechst 33342 *超级纯*

Hoechst 33342 *超级纯*

产品描述

Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低，在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 系列染料因与DNA结合的特性，也常被用来进行线粒体DNA的观察。Hoechst33258和Hoechst33342是两种非常相近的Hoechst染料，他们都在紫外段350nm被激发，发射波长都为461nm，两种染料经常被用来替代另一种荧光染料DAPI. Hoechst 33342比33258具有更强的亲脂性，因此能更好的透过完整的细胞膜，在部分实验中Hoechst33258的细胞透过性存在明显不足。用于细胞核染色时，*的Hoechst 33342工作终浓度为0.5-5μM，在一些敏感性实验时，设置多个染色浓度，以获得*染色效果。

技术参数

光学性质：Ex(nm)：350      Em(nm)：461

化学参数：分子量：561.93  溶剂：Water        CAS：23491-52-3

使用方法

1.缓冲液制备。用PBS或合适的缓冲液制备10～50µM Hoechst 33342染色液。

2.固定的细胞或组织染色。对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。依次按步骤进行免疫荧光染色，和Hoechst33342染色。如果不进行免疫荧光染色，则直接按步骤进行Hoechst33342染色。

a)对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。

b)吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或氯化钠溶液洗涤2-3次，每次3-5分钟。

c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长461nm。

3.活细胞或组织染色

a)细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。

b)在37℃培养细胞10～20分钟。

c)用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm，发射波长461nm。

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。-20℃干燥避光保存，保质期12个月。

注意事项

1.  Hoechst 33342溶于水，溶解度可达20μM(约10mg/ml)。您也可直接购买20μM的液体规格产品（货号:A5430L2670）。

2.  Hoechst 33342对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

3.  荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

4. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

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