HiPuri Beads全血基因组DNA提取磁珠试剂盒

HiPuri Beads全血基因组DNA提取磁珠试剂盒

产品介绍

   HiPuri Beads全血基因组DNA提取磁珠试剂盒适用于从抗凝处理的全血样品中快速、高效地提取基因组DNA。提取过程采用超顺磁性微球，无需离心操作；使用预制的缓冲液，可直接进行提取，无需预先去除红细胞。

本产品既可以手动进行少量样品的提取，也适合于用自动化工作站进行高通量操作。提取的产物可用于酶切，PCR扩增、检测等后续实验。

产品信息

操作流程

*使用前：

1、在Binding Buffer（③）中加入量（见瓶身标签）的异丙醇（分析纯），并于“口”内打上“√”，混匀后室温下密闭保存。

2、在Washing Buffer I （④）中加入量（见瓶身标签）的无水乙醇（分析纯），并于“口”内打上“√”，混匀后室温下密闭保存。

3、在Washing BufferⅡ（⑤）中加入量(见瓶身标签)的无水乙醇（分析纯），并于“口”内打上“√”，混匀后室温下密闭保存。

准备工作

1、1.5mL离心管：2个/样品

2、单通道移液器:20μL、200μL、1000μL

3、漩涡振荡器

4、垂直混合仪

5、恒温水浴锅/金属浴：55℃

操作步骤：

1、裂解

取一个新的1.5mL离心管，加入200μL的抗凝血液样品（不足200μL时可用PBS或Elution Buffer（⑥）补足），再分别加入10μL的Proteinase K Solution （⑦）和230μL的Lysis Buffer （②）,以涡旋振荡器zui大转速漩涡震荡10s后，置于55℃条件下反应5min。

2、结合

加入320μL的在Binding Buffer（③）(检查是否已加入异丙醇）和20μL的HiPuri Beads（①），以涡旋振荡器zui大转速漩涡震荡10min（或漩涡震荡10s后置于垂直混合仪上反应10min）。然后将离心管置于磁性分离器上放置2min，用移液器去上清液并取下离心管。

注：此步骤的磁性分离时间应不少于2min。

3、洗涤

（1）加入600μL Washing Buffer I （④）（检查是否已加入无水乙醇），漩涡震荡1min或用移液器缓慢吹打磁珠20次，使磁珠20次，使磁珠充分重悬，再将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器去上滑液并取下离心管。重复该步骤一次。

（2）加入600μL Washing BufferⅡ（⑤）（检查是否已加入无水乙醇），漩涡震荡1min或用移液器缓慢吹打磁珠20次，使磁珠充分重悬，再于室温下静置1min后，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液。

注：步骤（2）应尽量除尽洗涤液。

4、干燥

保持离心管于磁性分离器上，于室温下静置10min后，取下离心管。

5、洗脱

加入100~200μL Elution Buffer （⑥），用移液器缓慢吹打磁珠50次，使磁珠充分重悬。然后于55℃条件下加热5min，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，转移上清液至新的离心管中，此即为纯化得到的基因组DNA，可保存于-20℃。

注意事项

1、操作之前，请务必认真阅读本产品手册。

2、血液样品的质量对产物DNA的纯化量有较大影响，应避免反复冻融血液样品。

3、应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。

4、磁珠取用前应充分重悬均匀。

5、磁珠干燥前，应使用移液器吸尽洗涤液。

6、应避免磁珠过度干燥，否则会严重降低核酸洗脱效率。

7、建议使用质量好的离心管和移液器吸头，避免因粘附磁珠而造成损失。

8、在96孔板中进行磁性分离操作时，磁珠吸附时间可适当延长至4-5min。