温州鱼皮胶原蛋白肽生产线*

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采用酶法提取胶原蛋白时，必须严格控制提取条件。

首先，酶作用时间必须适当。如果时间过短，胶原蛋白，就不能充分释放到提取液中，影响提取率；如果酶作用时间过长，胶原蛋白会水解过度，产生过多的苦味小分子低聚肽，不仅会增加分离纯化的难度，也会影响胶原 蛋白的功能特性和生物活性。

其次，酶解温度要适宜。温度过低，酶的作用效果不明显；温度过高会引起酶的失活和胶原蛋白的变性。据报道，当介质pH略低于中 性时，胶原蛋白的变性温度为40～41℃，当介质pH为酸性时，胶原蛋白的变性温度为38～39℃，而且鱼皮胶原蛋白的变性温度要比猪皮胶原蛋白的变性温 度低7～12℃。所以，如果要使提取的胶原蛋白具有良好的生物活性，在提取过程中应使提取温度低于变性温度。

第三，需选用适当的酶。一般从陆生哺乳动物组 织中提取胶原蛋白时，采用胃蛋白酶在其zui适作用温度下进行提取是合理的，但对于鱼类等水生动物，由于其胶原蛋白的变性温度比陆生哺乳动物低，因此许多蛋白 酶便不适用，如果在这些酶的zui适作用温度下提取可能会破坏胶原蛋白的某些功能特性和生物活性。采用酶法提取胶原蛋白及其多肽的研究主要是从动物皮及其加工 副产物中，应用酶法从动物骨中提取胶原蛋白及其多肽报道较少。

纯化

可用于胶原蛋白的纯化方法包括盐析法、透析法、离心法、电泳法和色谱法，其中盐析法、离心法和电泳法zui为常用。由于单一方法难以*分离纯化胶原蛋白，实际 操作都是通过复合法来达到分离纯化胶原蛋白的目的。盐析法一般采用高浓度NaCl；离心法常选用制备型低温超速离心机；电泳法多采用十二烷基硫酸钠聚丙烯 酰胺凝胶电泳法（SDS-PAGE），该法既可用于胶原蛋白的分离纯化，还可用来测定胶原蛋白分子的相对分子质量。像有人用破碎、酶解、盐析三步法提纯苏 尼特羊骨骼I型胶原蛋白。先去除骨头里的非胶原物质，然后往沉淀中10%的胃蛋白酶，在4℃的条件下消化24h，以14000r/min离心40min。 弃沉淀往上清液中加NaCL，使它终浓度达到0.9moL/L，静止过夜，再离心，zui后的沉淀就是I型胶原蛋白。

温州鱼皮胶原蛋白肽生产线*酶解胶原蛋白的工艺

主要分为单酶水解法和多酶水解法。多酶水解法又分为混合酶水解法（比如牛胰蛋白酶，链霉菌蛋白酶，芽孢杆菌蛋白酶混合）和分步酶水解胃蛋白酶提取胶原蛋白的电泳图谱法， 酶法提取皮胶原具体实验工艺及条件的选取通常应考虑要开发的产品对分子量的要求，要得到分子量较小的胶原多肽一般采用多酶水解法。

影响酶解效果的因素主要 有：酶的种类、加酶量、酶解温度、酶解时间、pH值及料水比。

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