本试剂盒采用酶联免疫方法（ELISA）检测犬血清中的特异性抗狂犬病毒抗体，用于犬只免疫后抗体监测。
【试剂组成】
1.预包被板 | 48T/96T; | 8. 终止液（6号液） | 1支; | |
2.酶结合物原液 | 2支; | 9. 临界对照品 | 1支; | |
3.酶结合物稀释液 | 2支; | 10.阴性对照品 | 1支; | |
4.洗涤液（PBST干粉） | 1/2包; | 10.不干胶膜 | 1/2片; | |
5.底物（3号液） | 1支; | 11.自封袋 | 1个; | |
6.显色液（4号液） | 1支; | 12.使用说明书 | 1份; | |
7.样本稀释液（5号液） | 1支; |
【操作程序】
1. 酶结合物工作液配制：取1支酶结合物原液全部加入到1支酶结合物稀释液中，充分混匀即可使用。
2. 洗涤液配制：每袋PBST干粉用蒸馏水500ml溶解混匀，即为洗涤液。
3. 加样反应：每孔滴加样品稀释液2滴，加待检样品各5ul。每次试验需设阴性对照、临界对照各2孔，空白孔1孔（阴性对照、临界对照已稀释，试验时可直接取100ul加入孔内，空白孔仅加2滴样品稀释液）。放置37℃20分钟。倾去孔内液体，将已配制好的洗涤液加满每孔并静置30秒钟，倾去，甩干；共洗涤5次，拍干。
4. 加酶反应：除空白对照孔外，其余每孔加已稀释的酶结合物2滴，置37℃ 20分钟。然后如上洗涤。
5. 显色反应：加底物（3号液）和显色剂（4号液）各1滴，混匀，37℃下避光显色10分钟。加终止液（6号液）1滴，混匀，终止反应后判读结果。
【结果判断】
以空白对照调零，用酶标仪于450nm（630nm作参比波长）读取吸光度（A值）。A值≥临界对照均值为阳性，说明待检样品的抗体浓度≥0.5IU/ ml；低于者说明待检样品的抗体浓度<0.5IU/ml。。
【注意事项】
1.试剂盒于2-8℃保存，有效期6个月。每次使用前应先平衡至室温。
2.未使用完的板条应密封保存。已稀释的酶结合物工作液应尽快使用。
3.试剂盒中终止液具有腐蚀性，要小心使用。
4.瓶盖每次使用后要拧紧，各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。
5.试验样本应为无染菌、无血脂、无溶血的血清。任何样本都应视为传染源妥善处理。
6. 37℃孵育时，建议使用水浴箱。如无条件，可在温箱中放置湿盒进行反应并同时用不干胶膜封盖板孔。
特别提示：在使用酶结合物工作液之前，应确保酶结合物原液已加入酶结合物稀释液中并混匀！请在工作液瓶签上注明配置时间。
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