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测序揭示与干眼症有关的眼部微生物组差异2024/04/26
研究人员使用测序技术来确定健康眼睛患者的微生物组合与干眼症患者的微生物组合有何不同。这项新研究可能会改善各种眼部问题和影响身体其他部位疾病的治疗方法。我们体内和体表的微生物群落;统称为人体微生物群-;对保持我们的健康起着至关重要的作用。虽然许多研究都集中在我们肠道中的微生物群落，但了解存在于身体其他部位的微生物群对于提高我们对人类健康的认识和制定有针对性的疾病预防和治疗干预措施至关重要。VanKley实验室的研究生PallaviSharma在2024年3月23日至26日在圣安东尼奥举行的美国生物
细说Western Blot2023/10/19
与Southern或Northern杂交方法类似，但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白
染料法和探针法荧光定量PCR（RT-qPCR）的优缺点比较2023/10/18
一、荧光染料法(SYBRGreen)其原理是：在PCR反应体系中加入过量荧光染料，DNA扩增的过程中，荧光染料特异性地掺入DNA双链，发射荧光信号，随着反应的进行，荧光强度逐渐增强，并且可以实时测量。如果你要扩增你的目标样品40个循环，在最后一个循环结束时检测到的荧光会比在第10个循环测得的荧光强很多。优点：1、成本较低，适合大规模的实验。2、在实验设计阶段非常省时，因为它只需要合适的引物设计。缺点：1、特异性不是很高。染料可以插入任何双链DNA，包括引物二聚物和非特异性产物。2、如果引物二聚体
Bradford实验的蛋白标准曲线是线性的吗？2023/07/07
1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法（Bradford法）测蛋白浓度，是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白定量方法具有超过其他几种方法的突出优点，操作简便，反应迅速且稳定，灵敏度高，干扰因素少，因而得到广泛的应用。其原理是：考马斯亮兰G-250染料在酸性溶液中与蛋白质结合，主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合，使染料的最大吸收峰的位置，由465nm变为595nm，溶液的颜色也由棕红色变为蓝色，形成的复合物颜色深浅在一定范围内与蛋白质浓度成正比关
荧光定量 PCR 要点解析2023/06/27
一、荧光定量PCR原理荧光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团，通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。以探针法荧光定量PCR为例：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。开始时，探针完整地结合在DNA任意一条单链上，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收，检测不到荧光信号；PCR扩增时，Taq酶将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬
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