1.机械法

 

　　机械法是CHO细胞最早使用的传代方法，可采用开放式旋转培养瓶或滚筒式培养瓶进行传代。这种方法一般使用平滑的研磨器或压缩器，先将细胞切断，然后用PBS或其它体液冲洗，最后将细胞转移到新的培养瓶中继续生长。这种方法操作简单，效率高，但细胞的数量容易受到机械损伤的影响。

 

　　2.酶消化法

 

　　酶消化法在机械法的基础上发展而来，采用胰酶等酶类来消化细胞，可以降低细胞损伤，使得细胞转移更加稳定。先用PBS防止细胞损伤，然后加入胰酶等酶类，将细胞消化，最后将被消化的细胞转移到新的培养瓶中培育。这种方法无需使用研磨器或压缩器就能快速分离细胞，传代效率也很高。

 

　　3.缩减法

 

　　缩减法是一种时间较短、效率较高的CHO细胞传代方法，其步骤是:将旧的细胞培养基全部或部分抽取，加入和新生长培养基相同的成分，再加入较小的细胞数量，继续培养生长。这种方法减少了细胞之间的接触，防止了细胞的受空气的影响。

 

　　4.压力法

 

　　压力法是在缩减法的基础上发展而来的，采用了压力方式来让细胞实现传代，这种方法又叫压力透析法。适当调整细胞密度，把细胞装入滤膜中，然后施加合适的、足够的水压，让细胞穿过滤膜，在新的培养基中继续生长。这种方法操作简单，效率高。