热启动探针法定量PCR Mix 返回列表页

产品信息

产品描述

HRbio™ Probe qPCR Mix hUDG 是一款适用于DNA模板(如DNA病毒)的探针法qPCR DNA 聚合酶，以其的定量性被广泛应用，并能有效的防止污染，核心组分Taq HS DNA Polymerase是基于抗体法修饰，经过升级改造提升模板亲和能力的新一代热启动DNA聚合酶。

产品组分

a、内含dUTP 及含镁离子 buffer.    

b、内含 AB-HS Taq DNA polymerase

运输与保存方法

-20 ℃,保质期1年。

产品特点

1、qPCR反应；

2、高特异性和高灵敏度。

体系配制（以50μL反应体系为例）

注： 1、引物一般在 0.1μM-1μM 之间进行调整，一般情况下引物浓度在 0.2μM可达到理想的检测效果；

2、探针浓度一般在 50nM-250nM 质检进行调整；

3、扩增片段的长度一般在 80bp-150bp 之间。

反应条件

注：1、预变性时间设置：由于本试剂用到的是抗体修饰酶，需要热激活处理，一般建议预变性时间设为 95℃，3min。

• 退火温度和时间设置：请根据引物的 Tm 值和目的基因的长度进行调整。

热启动探针法定量PCR Mix

结果分析

1.扩增结束无扩增曲线

1）建议加入高浓度和高质量的 DNA 模板确保反转的成功；

2）引物是否降解，可以通过PAGE 胶确定其完整性；

3）反应循环数不够，一般将循环数设为 40-45 个循环；

4）确认PCR 程序设置中是否设置了荧光采集过程。

2.CT 值出现过晚

1）反应条件不够优化，可适当降低退火温度；

2）模板浓度过低或加样量不足；

3）PCR 产物过长，一般PCR 产物推荐长度为 80-150bp。

3.阴性对照有明显扩增

1）Mix 液、ddH2O、引物和探针可能存在污染，更换新的重新进行实验。

注意事项

本产品仅供科研用途！