| 培养基 |
| 作为zui早将动物细胞培养基商品化的企业，GIBCO至今仍保持了在此领域的*地位。我们可以提供的品种以满足用户不同的需求（培养基产品的详细信息请参考我司目录），每一种产品都通过zui为严格的品质管理。同时，我们也可按客户的要求对培养基的配方进行改动，或*按客户的配方进行生产。 |
| 在培养基的剂型方面，我们可以提供传统的干粉剂型，这种剂型有利于*储存并节省储存空间；同时，也可提供工作浓度的液体剂型，您可因此节省大量的时间和人力，并可减低因人为因素造成的每一批次培养基之间的差异；此外，我们*的10倍和50倍浓缩液体培养基，则结合了以上两种剂型的优点。 |
| 在包装方面，干粉状培养基通常都有10×1L，10L，50L包装，液体培养基通常都有100ml, 500ml, 1000ml包装，以适应不同使用规模的用户。液体培养基使用我司的E-Z HOLD塑料瓶装，方便安全。 |
| 更重要的是，GIBCO对培养基的品质精益求精地进行不断地改进。GIBCO的干粉培养基因其超细的研磨粒度而保证了在同类产品中的溶解性，睥睨群雄。 |
| 高级颗粒技术（AGT） |
| AGT是使用新型颗粒形式的干粉细胞培养基，zui适于研究和大规模生产的应用。通过将成熟的药物生产fluid bed granulation 技术应用到细胞培养基，我们现在能够提供具有容易使用方式的现代化的高复合配方。 |
| AGT是*的和pH值调节好的培养基。这种培养基zui主要的优点是给使用者提供了一种原材料，能够降低原材料计划、加工和检验相关的费用和时间。由于AGT培养基是*培养基，并且不需要调节pH值，培养基的准备时间也被缩短。此外，由于颗粒迅速水化，易于溶解，因而总的培养基配制时间减少。 |
| 培养基的生产和制备 |
| 液体培养基 |
| 水的制备 |
| 用于制备液体培养基的蒸馏水符合美国药典对注射用水的所有要求，包括蒸馏前的预处理。蒸馏得到的纯水经过*封闭的管道输送到使用地点，通过热交换器冷却到配制温度。所有的蒸馏、储存和输送过程中的管道均使用消毒的316低碳不锈钢构建。整个系统是由使用传感和报警装置的微处理器自动控制。连续的在线检测确保各种指标符合美国药典的要求。 |
| 化学品的加工 |
| 所有在液体培养基中使用的化学品原材料均经过严格的质量控制检测以保证我们的终产品的品质符合标准。这些化学品均符合ACS、FCC标准。当没有现存的标准时则采用我们的内部标准。已经确证高品质的化学品经过精确称量、核对，在经过校准的配制罐中溶解在蒸馏水中。 |
| 膜过滤 |
| GIBCO细胞培养基是在符合工业无菌标准1000级的设施内进行无菌过滤的。zui高的无菌标准为1000000级，在没有终端灭菌的条件下是难以实现的。控制无菌状态的关键在于对所有与产品接触的材料的有效的灭菌程序、综合性环境监测程序、对zui终过滤的整体检测程序等。此外，在正压条件下进行过滤和分装、HEPA过滤、环境控制等也是重要因素。罐装后的培养基经过严格的质量检测，直到质控报告完成，培养基的品质被证实符合我们的标准后方可出厂。 |
| 干粉状培养基 |
| 所有在干粉培养基中使用的化学品原材料均经过严格的质量控制检测以保证我们的终产品的品质符合标准。这些化学品均符合ACS、FCC标准。当没有现存的标准时则采用我们的内部标准。 |
| 质量控制 |
| 液体培养基 |
| 为了确保我们的确认系统和控制持续有效，检测采自每一批号的样品来确定液体培养基的质量。 |
| 化学检测 |
| 检测渗透压和pH值以验证符合产品规格。 |
| 微生物学检测 |
| 通过参考使用当前版《美国药典》无菌检测专论上的方法，确定液体培养基中没有细菌和真菌的污染。同时，使用Barile和Kern大体积接种的检测方法，确认动物来源的产品中没有支原体。这些检测的细节参看动物血清章节“微生物检测”。 |
| 生长性能和毒性检测 |
| 对液体培养基无细胞毒性和悬浮培养分析的生长促进作用进行检测。以5x10 细胞/ml密度接种迅速生长的鼠科骨髓瘤细胞系Sp2/O-Ag14到培养基中，通过监控对数生长率与生长在标准对照培养基中的培养进行比较。使用合适的细胞系对特殊培养用培养基进行性能检测，与*的参考标准进行比较。 |
| 内毒素检测 |
| 使用Limulus Amebocyte Lysate（LAL）试验检测内毒素值。通常可以获得行业上可达到的zui低水平内毒素的培养基。 |
| 稳定性检测程序 |
| 在每一个标记为体外诊断的产品，所显示的效期表明了这个产品具有多长时间的效能。我们的稳定性程序确定和证明了产品效期。周期间隙监测批量产品，确定产品在*贮存条件下具有可接受效果的时间长度。 |
| 干粉培养基 |
| 按照规范的要求，评估来自每一批次的样品，已确定干粉培养基的质量。准备1x液体形式的样品，膜过滤，监测可能包括： |
| ● | 生长促进/毒性 | | ● | 可溶性 | | ● | 渗透压 | | ● | pH值 | |
| 通过所述液体培养基检验条件，确定这些参数的数值。所有的干粉培养基中不包含碳酸氢钠，以增加其稳定性。 |
| 贮存条件 |
| 为了达到*的性能，根据标签上*的条件贮存细胞培养用产品，无论是在贮存或使用条件下，应该尽量减少液体培养基暴露在各种光源下。 |
| 质检报告 |
| 如果客户有要求，可以获得所有细胞培养用产品的质检报告。这一证书提供了除标准标签数据和公开说明书以外的，对全部GIBCO™细胞培养用液体培养基和试剂所进行检验的结果。也提供预期产品在使用上与公开的FDA指导方针*性相关的重要信息。 |
| 常用培养液配制方法 |
| 液体培养基：从10x浓缩液配制1x培养液 |
| 为了配制合乎标准、zui终单一浓度的培养液，在无菌条件下进行下列步骤。我们*在这个操作过程中使用双蒸水（cat.5230）和7.5%碳酸氢钠（cat.No.25080）。使用经过合适滤器进行滤膜过滤的无菌的1N氢氧化钠溶液或1N盐酸溶液。同时要注意，为了溶解，我们调节了10x培养基和10x平衡盐溶液的pH值，因而你需要在稀释后调节pH值，加入适量的碳酸氢钠。 |
| | 1. | 在无菌条件下，稀释100ml 10x 浓缩液到大约850ml蒸馏水中。 | | 2. | 在无菌条件下，加入正确量的7.5％碳酸氢钠溶液，加入量参看下表。 | | 3. | 如果必要，使用1N氢氧化钠或1N盐酸调节溶液pH值。1×pH值参看表右部。 | | 4. | 用双蒸水补充到总体积。 | | 5. | 分装溶液到无菌的容器中，用无菌的瓶塞盖紧瓶子，在*的条件下存放培养液。 | |
| | 使用7.5％碳酸氢钠溶液（cat.No.25080）时碳酸氢钠加入量 | | | 10x 溶液pH值 | NaHCO3 g/L ml/L 7.5soln. | 1:10稀释和加入NaHCO3后pH值 | *1x soln.a pH值 | | 平衡盐溶液 | | 14065 | 5.8-6.1 | 0.35 4.7 | 7.5-7.8 | 7.0-7.4 | 14080 | 4.4-4.7 | － N/A | 5.2-5.5 | 7.0-7.2 | | 14185 | 5.8-6.1 | 0.35 4.7 | 6.0-6.3 | 7.0-7.4 | | 14200 | 6.7-7.0 | － N/A | 7.1-7.4 | 7.0-7.2 | | 液体培养基 | | 11430 | 4.9-5.4 | 2.2 29.3 | 7.6-7.9 | 7.0-7.4 | | a. pH值的变化依赖于稀释所使用水的pH值。 b. 配方中不要求加入NaHCO3 | |
| 配制干粉培养基 |
| | 1. | 在一个尽可能接近总体积的容器中加入比预期培养基总体积少5％的双蒸水。 | | 2. | 在室温（20℃到30℃）的水中加入干粉培养基，轻轻搅拌，不要加热。 | | 3. | 水洗包装袋的内部，转移全部的痕量干粉到容器内。 | | 4. | 加NaHCO3到1L的培养基中。碳酸氢钠的加入量参看下表。 | | 5. | 用双蒸水稀释到想要的体积，搅拌溶解。注意不要过分搅拌。 | | 6. | 通过缓慢搅拌加入1N NaOH 或1N HCL调节pH值，由于pH值在过滤时会上升0.1到0.3，因而调节pH值使它比zui终想要的pH值低0.2到0.3。培养基在过滤前要保持密封。 | |
| 细胞分离 |
| 从原代组织中分离细胞 |
| 从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短，以保持zui大的活性。下列步骤可以解聚整个组织，获得较高产量的有活性细胞。 |
| 胰蛋白酶 Trypsin | 1. | 在去除不需要的组织后，使用无菌的解剖刀和剪子把剩余的组织切成3-到4-mm 小片，通过悬浮在无钙镁的平衡盐溶液中清洗组织碎片。让组织碎片沉淀，去除上清液。重复清洗2到3次。 | | 2. | 将盛有组织碎片的容器置于冰上，去除残留的上清液。加入0.25％溶解在无钙镁的平衡盐溶液中的胰蛋白酶（100mg组织加入1ml 胰蛋白酶）。 | | 3. | 在4℃孵育6到18小时，使几乎没有胰蛋白酶活性的酶尽可能渗透进去。 | | 4. | 移弃组织碎片中的胰蛋白酶，在37℃孵育包含残留胰蛋白酶的组织碎片20到30分钟。 | | 5. | 在组织碎片加入热的*培养基，用移液管轻轻地分散组织。如果使用无血清培养基，要加入大豆胰蛋白酶抑制剂。 | | 6. | 通过无菌不锈钢丝网（100～200 mm）过滤，以*分散所有剩余组织。计数和接种细胞，进行培养。 | |
| 胶原酶 Collagenase | 1. | 使用无菌的解剖刀和剪子把剩余的组织切成3-到4-mm小片，用Hanks'平衡盐溶液（HBSS）清洗组织碎片几次。 | | 2. | 加入胶原酶（50～200单位/ml，溶解在HBSS中）。 | | 3. | 在37℃孵育4到18小时。加入3mM CaCl2增加解离效率。 | | 4. | 通过无菌不锈钢丝网或尼龙网过滤细胞悬液，以分离分散细胞、组织碎片和较大的碎片。如果需要进一步的解聚，在碎片中加入新鲜的胶原酶。 | | 5. | 通过离心在HBSS中清洗悬液几次。 | | 6. | 再一次在培养基中悬浮细胞，计数和接种细胞，进行培养。 | |
| Dispase | 1. | 使用无菌的解剖刀和剪子把剩余的组织切成3-到4-mm小片，用不包含有钙镁的平衡盐溶液清洗组织碎片几次。 | | 2. | 加入Dispase （0.6～2.4单位/ml 溶解在无钙镁的平衡盐溶液） | | 3. | 在37℃孵育20分钟到几个小时。 | | 4. | 通过无菌不锈钢丝网或尼龙网过滤细胞悬液，以分离分散细胞、组织碎片和较大的碎片。如果需要进一步的解聚，在碎片中加入新鲜的Dispase。 | | 5. | 通过离心在平衡盐溶液中清洗悬液几次。 | | 6. | 再一次在培养基中悬浮细胞，计数和接种细胞，进行培养。 | |
| 从原培养容器中分离细胞 |
| 以下是从基层迅速分离细胞，而且保持细胞完整性的一般步骤。这一步骤并不意味着对于所有细胞系的广泛的应用，每一种系统*条件和施用浓度应该根据经验加以确定。 |
| ● 再次培养时检测细胞的活性。 ● 细胞的活率应该超过90％ ● 对于无血清培养基，建议降低胰蛋白酶使用量。 |
| | 1. | 移弃使用过的细胞培养基。 | | 2. | 使用不包含有钙镁的平衡盐溶液或EDTA清洗细胞（看表确定正确的清洗溶液）。在培养瓶对着细胞的一面加入清洗溶液，通过转动培养瓶1到2分钟清洗细胞层，然后去除清洗液。 | | 3. | 以2～3ml/25cm²的量，加选择的分离液（见表）到培养瓶对着细胞的一面。确保分离液覆盖细胞层。在37℃孵育培养瓶，轻轻摇动培养瓶。通常，在5到15分钟内，细胞就会脱落。细胞分离需要的时间因细胞系不同而有所变化。仔细监测细胞分离过程，避免细胞受损伤。对难于从培养瓶基层分离的细胞系，可以轻轻敲打，以加速分离过程。 | | 4. | 当细胞*分离时，垂直放置培养瓶，让细胞流到培养瓶的底部。在培养瓶中加入*培养基，通过移液管在单层细胞表面反复吹打来分散细胞。计数并再次培养细胞。 | | | 注释：对于无血清培养基，加入大豆胰蛋白酶抑制剂。通常使用1∶1（v∶v）0.25mg/ml胰蛋白酶抑制剂到胰蛋白酶中将抑制胰蛋白酶活性。 | |
| | 培养类型 | 清洗溶液 | 分离溶液 | GIBCO™产品和目录号 | | 大部分连续细胞系 强贴壁细胞系 许多早代细胞 | HBSS或无钙镁PBS | 0.25％胰蛋白酶溶解在无钙镁平衡盐溶液中 | 0.25％ Trypsin（液体） 15050-065 2.5％Trypsin（液体） （10x）15090-046 Trysin 粉末（1∶250） 27250-018 | | 细胞表面蛋白完整性重要的连续细胞系 | HBSS或无钙镁PBS | 0.05％胰蛋白酶溶解在0.53mM EDTA | 0.05％Trysin 0.53mM EDTA （液体） 25300-054 0.05％Trysin 0.53mM EDTA（冻干） 15305-014 0.05％Trysin 0.53mM EDTA（10x）（液体）15400-054 | | 弱贴壁表皮细胞 转化成纤维细胞 要求细胞表面完整性 原代细胞 | HBSS或无钙镁PBS | EDTA,甘油 溶解在柠檬酸钠中 | 无酶细胞分离缓冲液 Hanks'基础 13150-016 PBS基础 13151-014 | | 强贴壁早代细胞系 | HBSS或无钙镁PBS | 0.25％胰蛋白酶溶解在1mM EDTA Dispase 0.6-2.4单位/ml 溶解在PBS | 0.25％Trysin1mM EDTA 液体 25200-056 Dispase 17015-041 | | 上皮细胞a | 0.5mM -1mM EDTA | 0.5mM -1mM EDTA Dispase 0.6-2.4单位/ml 溶解在PBS | Versene 1:5,000（0.53 mM EDTA 溶解在PBS）15040-066 Dispase 17015-041 | | 强贴壁细胞a 上皮细胞 一些肿瘤细胞 | 0.5mM -1mM EDTA | 0.25％胰蛋白酶1mM EDTA Dispase 0.6-2.4单位/ml 溶解在无钙镁PBS | 0.25％Trysin1mM EDTA 25200-056 Versene 1:5,000（0.53 mM EDTA 溶解在PBS）15040-066 Trysin 粉末（1∶250） 27250-018 Dispase 17015-041 | | 厚培养物，多层a 富含胶原的密集培养 | 1mM EDTA | 0.25％胰蛋白酶 200单位/ml胶原酶，1mM EDTA溶解在无钙镁平衡盐溶液中 | 0.25％Trysin1mM EDTA 25200-056 Collagenase 17100,17101,17102,17104 Trysin 粉末（1：250） 27250-018 | | 所有贴壁培养 | HBSS或无钙镁PBS | 刮离细胞b | - | | a. 一些细胞可能对EDTA敏感。 b. 刮离细胞可能引起机械损伤，将不会得到单细胞悬液。 | |
| 哺乳细胞的冻存 |
| 为了避免污染造成的损失，zui小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。 |
| 有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下： | | * | 包含10％甘油的*培养基， | | * | 包含10％二甲基亚砜（DMSO）的*培养基， | | * | 50％ 细胞条件培养基和50％含有10％甘油的新鲜培养基，或 | | * | 50％ 细胞条件培养基和50％含有10％二甲基亚砜的新鲜培养基。 | | 对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是： | | * | 50％ 细胞条件无血清培养基和50％包含有7.5％二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基，或 | | * | 包含有7.5％二甲基亚砜和10％细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。 | |
| 悬浮培养 | 1. | 计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生*。以大约200～400g离心5分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到zui小体积，不要搅乱细胞。 | | 2. | 以1×10 到5×10细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以 0.5×10到1×10在无血清培养基中，再次悬浮细胞。 | | 3. | 分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。 | | 4. | 细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。 | |
| 贴壁细胞 | 1. | 使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到zui小。 | | 2. | 在*生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。 | | 3. | 以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到zui小体积，不要搅乱细胞。 | | 4. | 以5×10 到1×10细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。 | | 5. | 分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。 | | 6. | 细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。 | |
| 冻存细胞的复苏 |
| 冻存细胞比较脆弱，要求轻柔的操作。冻存细胞要快速融化，并且直接加入*生长培养基中。如果细胞对冻存剂（DMSO或甘油）特别敏感，离心去除冻存培养基，然后加入*生长培养基中。 |
| 直接铺板方法 | 1. | 取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化。 | | 2. | 直接用*生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10到20ml *生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在3×10活细胞/ml。 | | 3. | 培养细胞12到24小时，更换新鲜的*生长培养基，去除冻存剂。 | |
| 离心方法 | 1. | 取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化。 | | 2. | 把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml*生长培养基，轻轻混匀。 | | 3. | 以大约80x g离心2到3分钟。 | | 4. | 弃去上清。 | | 5. | 在*生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。 | | 6. | 细胞铺板，细胞接种应该至少为3×10活细胞/ml。 | |
| 常用细胞系及使用培养基 | 细胞系 | 细胞类型 | 种 | 组 织 | 培养基 | | 293 | 成纤维细胞 | 人 | 胚胎肾 | MEM, 10% 热灭活马血清 | | 3T6 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM, 10% 胎牛血清 | | A549 | 上皮细胞 | 人 | 肺癌 | F-12K, 10%胎牛血清 | | A9 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 结缔组织 | DMEM, 10% 胎牛血清 | | AtT-20 | 上皮细胞 | 小鼠 | 垂体肿瘤 | F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清 | | BALB/3T3 | 成纤维细胞 | 小鼠 | 胚胎 | DMEM, 10% 胎牛血清 | | BHK-21 | 成纤维细胞 | 仓鼠 | 肾 | GMEM, 10% 胎牛血清 或MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA | | BHL-100 | 上皮细胞 | 人 | 乳房 | McCoy'5A, 10% 胎牛血清 | | BT | 成纤维细胞 | 牛 | 鼻甲骨细胞 | MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA | | Caco-2 | 上皮细胞 | 人 | 结肠腺癌 | MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA | | Chang | 上皮细胞 | 人 | 肝脏 | BME, 10% 小牛血清 | | CHO-K1 | 上皮细胞 | 仓鼠 | 卵巢 | F-12, 10%胎牛血清 | | Clone 9 | 上皮细胞 | 大鼠 | 肝脏 | F-12K, 10%胎牛血清 | | Clone M-3 | 上皮细胞 | 小鼠 | 黑素瘤 | F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清 | | COS-1 | 成纤维细胞 | 猴 | 肾 | DMEM, 10% 胎牛血清 | | COS-3 | 成纤维细胞 | 猴 | 肾 | DMEM, 10% 胎牛血清 | | COS-7 | 成纤维细胞 | 猴 | 肾 | DMEM, 10% 胎牛血清 | | CRFK | 上皮细胞 | 猫 | 肾 | MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA | | CV-1 | 成纤维细胞 | 猴 | 肾 | MEM, 10% 胎牛血清 | | D-17 | 上皮细胞 | 狗 | 骨肉瘤 | MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA | | Daudi | 成淋巴细胞 | 人 | 淋巴瘤病人血液 | RPMI-1640, 10% 胎牛血清 | | GH1 | 上皮细胞 | 大鼠 | 垂体肿瘤 | F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清 | | GH3 | 上皮细胞 | 大鼠 | 垂体肿瘤 | F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清 | | H9 | 成淋巴细胞 | 人 | T细胞淋巴瘤 | RPMI-1640, 20% 胎牛血清 | | HaK | 上皮细胞 | 仓鼠 | 肾 | BME, 10% 小牛血清 | | HCT-15 | 上皮细胞 | 人 | 结肠直肠腺癌 | RPMI-1640, 10% 胎牛血清 | | HeLa | 上皮细胞 | 人 | 子宫颈癌 | MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA（in suspension, S-MEM） | | HEp-2 | 上皮细胞 | 人 | 喉癌 | MEM, 10% 胎牛血清 | | HL-60 | 成淋巴细胞 | 人 | 早幼粒细胞白血病 | RPMI-1640, 20% 胎牛血清 | | HT-1080 | 上皮细胞 | 人 | 纤维肉瘤 | MEM, 10% HI 胎牛血清 和 NEAA | | HT-29 | 上皮细胞 | 人 | 结肠腺癌 | McCoy'5A, 10% 胎牛血清 | | HUVEC | 内皮细胞 | 人 | 脐带 | F-12K, 10% 胎牛血清 和 肝素盐 100 ug/ml | | I-10 | 上皮细胞 | 小鼠 | 睾丸癌 | F-10, 15% 马血清和2.5% 胎牛血清 | | IM-9 | 成淋巴细胞 | 人 | 骨髓瘤病人骨髓 | RPMI-1640, 10% 胎牛血清 | | JEG-2 | 上皮细胞 | 人 | 绒毛膜癌 | MEM, 10% 胎牛血清 | | Jensen | 成纤维细胞 | 大鼠 | 肉瘤 | McCoy's 5A, 5% 胎牛血清 | | Jurkat | 成淋巴细胞 | 人 | 淋巴瘤 | RPMI-1640, 10% 胎牛血清 | | K-562 | 成淋巴细胞 | 人 | 骨髓性的白血病 | RPMI-1640, 10% 胎牛血清 | | KB | 上皮细胞 | 人 | 口腔癌 | MEM, 10% 胎牛血清和NEAA | | KG-1 | 骨髓白细胞 | 人 | 红白血病病人骨髓 | IMDM, 20% 胎牛血清 | | L2 | 上皮细胞 | 大鼠 | 肺 | F-12K, 10%胎牛血清 | | L6 | | 大鼠 | 骨骼肌成肌细胞 | DMEM, 10% 胎牛血清 | | LLC-WRC 256 | 上皮细胞 | 大鼠 | 癌 | Medium 199, 5% 马血清 | | McCoy | 成纤维细胞 | 小鼠 | 未知 | MEM, 10% 胎牛血清 | | MCF7 | 上皮细胞 | 人 | 乳腺癌 | MEM, 10% 胎牛血清 NEAA, 10ug/ml 胰岛素 | | WEHI-3b | 类巨噬细胞 | 小鼠 | 骨髓单核细胞白血病 | DMEM, 10% 胎牛血清 | | WI-38 | 上皮细胞 | 人 | 胚胎肺 | BME, 10% 胎牛血清 | | WISH | 上皮细胞 | 人 | 羊膜 | BME, 10% 胎牛血清 | | WS1 | | 人 | 胚胎皮肤 | MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA | | XC | 上皮细胞 | 大鼠 | 肉瘤 | MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA | | Y-1 | 上皮细胞 | 小鼠 | 肾上腺瘤 | F-10, 15% 马血清和 2.5% 胎牛血清 | |
