南极热敏UDG 返回列表页

南极热敏 UDG 是来源于嗜冷海洋细菌经大肠杆菌表达纯化的的重组蛋白。
该酶能有效地水解单链或双链DNA 上的niao嘧啶，产生的缺嘧啶位点，在高温或高 pH下，极易水解断裂。该酶对 RNA 无活性，主要用于 PCR扩增产物的防污染。大肠杆菌来源的niao嘧啶-DNA 糖基化酶较为耐热，经 95℃10min 处理仍会残留有少量的niao嘧啶-DNA 糖基化酶活性，导致含有 dU 碱基的 PCR 产物的降解。
而来源于嗜冷海洋细菌的热敏型 UDG 在 50℃5min 即失活，在进行 PCR 扩增前，在 PCR 混合液中添加niao嘧啶-DNA 糖基化酶（热敏性），25℃ 2min 即可消除以往 PCR 产物的残留污染，由于niao嘧啶-DNA 糖基化酶（热敏性）在 PCR 循环的 94℃变性一步便可被灭活，因此不会影响新的含 dU 的 PCR 产物。

活性定义：在标准反应体系下，37°C 每分钟催化 60 pmol niao嘧啶从含niao嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量为一个活性单位。
反应 Buffer：
ThermoLabile Uracil DNA Glycosylase (UDG)与绝大多数的 PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的，但在高离子浓度(>100 mM)下活性会受到抑制。在防污染 PCR 中的使用浓度推荐为 10 mU-50 mU/μ（l 25℃下作用 2min 即可），在不同的缓冲系统下可能会有差别。
酶储存液：20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, ,50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。
储存：置于-20°C 可保存 2 年。
热失活：50°C，5min。