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细胞培养基的性质

时间:2016/12/1
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       细胞生物反应器pH:多数细胞系在pH7.4下生长得很好。各细胞株之间,细胞生长pH值变化很小,一些正常的成纤维细胞系以pH7.4-7.7,转化细胞系pH7.0-7.4更适合。据报道,上皮细胞可在pH5.5维持。为确定pH值,做一个简单的生长实验或特殊功能分析

       细胞生物反应器缓冲:培养基要在两种条件下有缓冲作用:①开式皿中,CO2的稀放引起pH升高;②在高细胞密度下,转化细胞系大量产生CO2和乳酸,引起pH下降。为了稳定pH值,可以加入缓冲物。

尽管碳酸氢钠缓冲系统在pH下的缓冲能力差,但由于它毒性小,成本低,对培养物有营养作用,它仍比其他缓冲系统用得多。HEPES在pH7.2-7.6下缓冲作用强得多,现在广泛采用的浓度是10mmol/L或20mmol/L。

       细胞生物反应器渗透压:多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围。人细胞浆的渗克分子浓度是290mOsm/kg,因而推测这是体外人细胞的zui值,尽管这与其他细胞不同(如小鼠大约是310mOsm/kg)。实际上,多数细胞在260-320mOsm/kg之间*可行。

       温度:除了温度对细胞生长的直接作用之外,由于低温下CO2溶解度增加,很可能由于缓冲剂的离子化和pKa上的变化,温度也会影响pH。

       黏度:培养基的黏度主要受血清含量的影响,在多数情况下,对细胞生长没什么影响。可是,每当细胞悬浮液要搅拌时(如悬浮培养物被搅拌或者胰蛋白酶消化后解离细胞时),它变得重要了。若在搅拌条件下细胞受到损害,那么用羧甲基纤维素或聚已烯基吡咯烷增加培养基的黏度,可减轻细胞损害。在低血清浓度或无血清下,这特别重要。

       表面张力和泡沫:培养基的表面张力可用来促进原代外植物贴附到介质上,但很少用某种方法控制它。

        泡沫作用还不清楚。泡沫使蛋白质的变性速率增加。如果泡沫达到培养容器的颈部,增加了污染的危险。悬浮培养中,用含5%CO2的空气在含血清培养基中鼓泡,会产生泡沫。加入硅油消泡剂降低表面张力,有助于防止泡沫生成。

 

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