Nature改变了我们对突变的看法：DNA损伤可以持续数年无法修复2025/1/17

新的研究表明，虽然大多数已知类型的DNA损伤是由我们细胞内部的DNA修复机制修复的，但某些形式的DNA损伤逃避修复，并可能持续多年。这意味着这种损伤有多次机会产生有害的突变，从而导致癌症。来自威康-桑...

荧光定量 PCR 的应用2024/12/18

分子生物学研究1核酸定量分析。对传染性疾病进行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的检测,比如近期流行的甲型H1N1流感，转基因动植物基因拷贝数的检测，RNAi基因失活率的检测等。2基因表达差异分析。比...

超全荧光定量PCR应用常见问题汇总！2024/11/11

实时荧光定量技术是什么20世界90年代由美国AppliedBiosystems公司推出实时荧光定量PCR技术（Real-timeqPCR），其基本原理是在常规PCR基础上添加荧光染料或荧光染料探针，利...

PCR扩增的抑制剂有哪些？2024/10/2

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其产物的生成量是以指数方式增加，能将皮克(pg）量级的起始待测模板扩增到微克（μg）水平。可以从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的...

干货：如何增加PCR特异性？2024/9/7

引物设计细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异性的引物所具有的令...

融解曲线中那些令你头疼的问题2024/8/24

融解曲线中那些令你头疼的问题，全面解析看这里！我们在做染料法SYBRGreenqPCR时，除了要看扩增曲线的CT值大小外，另一个重要的指标是融解曲线是否为单峰。那您知道融解曲线是怎么来的吗？为什么说它...

细胞支原体污染的检测方法2024/8/17

培养的细胞可能会污染支原体，支原体是一种常见的细菌，它可以在实验室环境中生长和繁殖。如果实验操作不当，可能会导致支原体污染细胞培养物。此外，一些细胞系可能已经被感染了支原体，一些培养用的试剂也可能带有...

衣原体检测的方法及优缺点2024/7/28

衣原体属于原核生物，严格细胞内寄生，是一种比细菌小比病毒大的微生物，能通过细胞滤器，有特殊的两相发育周期。它没有合成高能化合物ATP、GTP的能力，必须由宿主细胞提供，因而必须依靠寄生才能生存。衣原体...

常见测蛋白浓度方法的优缺点比较2024/7/20

蛋白浓度测定的方法有很多，但每种方法都有其特点和局限性，因而需要在了解各种方法的基础上根据不同情况选用恰当的方法，以满足不同的要求。例如凯氏定氮法结果精确，但操作复杂，用于大批量样品的测试则不太合适；...

测序揭示与干眼症有关的眼部微生物组差异2024/4/26

研究人员使用测序技术来确定健康眼睛患者的微生物组合与干眼症患者的微生物组合有何不同。这项新研究可能会改善各种眼部问题和影响身体其他部位疾病的治疗方法。我们体内和体表的微生物群落;统称为人体微生物群-;...

染料法和探针法荧光定量PCR（RT-qPCR）的优缺点比较2023/10/18

一、荧光染料法(SYBRGreen)其原理是：在PCR反应体系中加入过量荧光染料，DNA扩增的过程中，荧光染料特异性地掺入DNA双链，发射荧光信号，随着反应的进行，荧光强度逐渐增强，并且可以实时测量。...

Bradford实验的蛋白标准曲线是线性的吗？2023/7/7

1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法（Bradford法）测蛋白浓度，是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白定量方法具有超过其他几种方法的突出优点，操作简便，反应迅速且稳定，灵敏度高...

荧光定量 PCR 要点解析2023/6/27

一、荧光定量PCR原理荧光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团，通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法...

细说Western Blot2023/6/22

与Southern或Northern杂交方法类似，但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载...