单组分 TMB 显色液
货号 | 品名 | 规格 |
QYE-910 | 单组分 TMB | 100ml |
QYE-950 | 单组分 TMB | 500ml |
保存:2-8℃,请勿冷冻。
稳定性:2-8℃条件下,大于 18 个月。敏感性:高于AB 双液。
组成:TMB,稳定剂。
产品外观:单组分 TMB 过氧化物酶底物正常情况下淡黄色、淡蓝色或者是淡绿色。底物溶液 37℃ 温浴 15 分钟后,在 650nm 时检测OD 值小于 0.04。
产品说明:
TMB 因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。单组分 TMB 过氧化物酶底物与辣根过氧化物酶连接物反应时产生一种深蓝色的产物,适用于定量以及定性分析的酶联免疫分析当中。又分 可溶型和沉淀型。
可溶型 | 沉淀型 |
可溶性蓝褐色产物 | 沉淀性蓝褐色产物 |
适用于 ELISA及其他通过液体反应检测HRP 的应用 | 适用于Western Blot 及其免疫沉淀化学等等 |
一步即用型溶液,无需混合,方便快捷 |
使用方法
使用之前,以超纯水反复洗涤的适当容器, 倒出适量单组分TMB 底物溶液,即可使用。
加液:加完 HRP 结合物并温育一定时间后, 洗板 3-5 次,每孔加 TMB 底物 100- 150uL, 37°C 温育 5-30 分钟。
终止(备选):加等体积的 1N 的 HCl 或者 2N 的 H2SO4 来终止反应。酶标孔中反应液从蓝色变为黄色。
读数:终止反应后,30 分钟内在 450nm 处读数。不加终止液,显色更加稳定,可以在 620-650nm处读数,
注意:
降低底物强度:如果出现高的反应背景和/或沉淀,表明 TMB 底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可以在加入终止液后马上读数;另外,可以进一步稀释一抗和/或HRP 结合物。为了降低非特异性背景颜色,推荐进一步降低一抗和/或 HRP 结合物的浓度,尽量避免降低底物浓度。动力学检测:TMB 单组分底物在与过氧化物酶反应时产生一种蓝色,可以在加底物后 620-650nm 处读数, 不需终止反应。
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