麦芽糖含量高效液相色谱法测定-齐一生物

麦芽糖含量测定意义：
麦芽糖是淀粉、糖原、糊精等大分子多糖类物质在β－淀粉酶催化下的主要水解产物，再经麦芽糖酶催化，则被水解成两个 D-葡萄糖分子。麦芽糖可用作甜味剂，是一种廉价的营养食品，容易被人体消化和吸收，广泛应用于食品行业，测定食品中麦芽糖含量具有重要意义。  
麦芽糖含量测定原理：
利用示差折光检测器测定麦芽糖含量。
麦芽糖的提取：
1、组织的处理：按照组织质量（g）：超纯水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.2 g组织，加入 2mL 超纯水），匀浆，倒入 2mLEP 管中，8000g 4℃离心 10 min，取上清液，调 PH 值至 5-9，水系针头式过滤器过滤后待测。
2、液体样品：取 2mL 液体样品，调 PH 至 5-9，水系针头式过滤器过滤后待测。
麦芽糖含量标准品的配制：
麦芽糖含量测定操作步骤：
1.开启电脑、泵、检测器和自动进样器，用超纯水冲洗仪器，冲洗体积为100mL，必须保  证整个线路中充满水，不能把有机相带入色谱柱。
2.安装上色谱柱，放入柱温箱，设置流速0.2 mL/min，冲洗5min后，设置柱温为85℃，待
温度升到所需温度后，逐渐提高流速至0.6mL/min，并注意柱压不超过1000psi。
3.设置进样量 10 μL，流速 0.6 mL/min，保留时间 15min。待流速达到 0.6mL/min 后，查看基线。
4.待基线稳定后上样检测，先加入标准品 10 μL，麦芽糖的保留时间在 9min 左右，（仪器和检测环境不同，保留时间有差异），计算不同浓度的麦芽糖标准品的峰面积；加入样品 10 μL， 在相应保留时间处检测麦芽糖的峰面积。
5.测定结束后，调整流速为0.2mL/min，关闭柱温箱的加热系统；待柱温降到40℃以下，
停止流动相。
麦芽糖含量的计算：
以标准品浓度（mg/mL）为横坐标，峰面积为纵坐标计算麦芽糖标准曲线。将样品峰面积代入标准曲线，计算样品麦芽糖含量。

齐一生物科技（上海）有限公司我司拥有高效液相色谱、气相色谱仪、液质联动分析仪。可以为广大同学、老师提供各类样本测定服务。