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单克隆抗体技术检测新城疫

来源:上海源叶生物科技有限公司   2011年03月07日 10:02  

单克隆抗体仅仅识别一个抗原位点,用抗病毒蛋白的单克隆抗体就可以检测出各种病毒毒株表面抗原之间的微小差异,从而通过抗原差异来研究病毒的变异并可对其分群归类。20世纪80年代以来,国内外很多实验室已制备出多株NDV单克隆抗体,并用其测知NDV有很多变种。

Russell等在1983年zui早以Ulster 2C弱毒株为抗原研制出针对新城疫病毒不同多肽成分的9株单克隆抗体,将新城疫病毒的毒株分为A—H 8个群,同一群中的病毒与这些单抗的反应谱相同,大多数具有共同的生物学和流行病学特征。随后国内外许多学者分别研究出了针对新城疫病毒不同特征的单抗,应用于病毒抗原差异等的研究。因为传统的新城疫诊断中,使用多克隆抗血清进行HI试验来鉴定病毒,这种试验除可证明病毒存在外,不能提供病毒的任何其他信息,而为了分型常需进行其他的试验。这种诊断所存在的问题,会随着新城疫变异株的增多而增多,而且,HI试验中与其他一些禽副黏病毒(尤其是与PMV-3型)存在交叉反应。单抗的应用克服了常规血清的交叉反应问题,所以应用单抗诊断新城疫病毒的研究日益增多。

Meulemans等用两种单抗混合物进行HI试验,发现它能够高度抑制所有新城疫病毒被检株,但与其他血清型的禽副黏病毒代表株不发生交叉反应。

Alexander等应用一种单抗,能在常规HI试验中抑制大多数新城疫病毒毒株,但不能抑制近来流行于鸽的变异株。

Judit等(1989)选出一株单抗在ELISA试验中对所有被检的300多个强毒、中等毒力和弱毒株只能与LaSota株结合。

曹殿军等制备了46株抗新城疫病毒单抗,检测它们与不同新城疫病毒毒株的反应性,证明单抗能检出强、弱毒株之间的差异,为建立一种特异性强、灵敏度高、省时省力的新城疫病毒强、弱毒株鉴别诊断方法提供了实验依据。但由于单抗的制备比较复杂、困难,限制了该技术的广泛应用。

对单克隆抗体分组的结果分析发现,在同组里的毒株有明显的生物学及流行病学上的,这对抗原的变异及病毒的流行扩散的研究都有重要意义。

单克隆抗体在检测抗原性差异方面显示出了*的*性,它可检出抗原的微小差异,甚至单个氨基酸的变化也能检出,从而使特异单抗成为区别NDV各毒株抗原性的有效手段,在NDV鉴定、分型、致病机理等研究方面将发挥重要的作用。
 

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