薄层扫描法测定葶苈降血脂胶囊中大黄素含量

摘要:本文采用薄层扫描法，以氯仿-甲醇-苯（2O：1.5：O.5）为展开剂，测定波长450nm，参比波长700nm，测定大黄素的含量，结果表明，大黄素在0～1μg范围内线性关系良好，r=O.9994，加标回收率为99.69％，RSD为O.88％（n=5），本法简便快速。
关键词:葶苈降血脂胶囊;大黄素;含量测定;薄层扫描法
葶苈降血脂胶囊是由葶苈子、山楂、大黄等七味中药组成，有宣通导滞、通络散结、消痰渗湿之功能，临床主要用于高脂血症。该新药于2002年获新药转正，国家药品监督管理局国家药品标准WS3-212（X-202）-2002Z。该转正标准没有大黄素的含量测定。我们对葶苈降血脂胶囊大黄素的含量进行了探讨，zui终采用了薄层扫描法，本方法结果准确，方法简便，稳定性、精密度、重现性、回收率均理想。本文就大黄素含量测定方法的建立做一论述。
1 仪器与试药
CS930薄层扫描仪（日本岛津公司），层析用硅胶G（青岛海洋化工厂），大黄素对照品0756—200009（中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用）；葶苈降血脂胶囊（吉林通化金汇药业有限公司）。试剂均为分析纯。
2 实验条件
0.5％CMC-Na硅胶G板（200×200×0.5mm），展开剂：氯仿-甲醇-苯（20：1．5：0.5），日光下定位。
吸取对照品溶液，供试品溶液，阴性样品溶液各4μl，分别点于同一羧甲基纤维素钠硅胶G薄层板上，以法展开，在370～700nm下扫描，结果450nm处有zui大吸收，而阴性样品未见干扰，故将测定波长定为450nm，参比波长λR=700nm，采用反射法锯齿扫描，SX=3，狭缝为1.2×6mm。
3 方法与结果
3．1 供试品溶液的制备
取本品研细，取1.5g精密称定，置索氏提取器中，加入甲醇适量，加热回流，提取至无色，提取液回收甲醇至干，残渣加水20ml，盐酸2ml，加热回流1h，冷却后，用乙醚提取6次，每次20ml，低温挥去乙醚。残渣加甲醇适量使溶解，定量转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀为供试品液。
3．2 对照品溶液的制备
称取大黄素对照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液作为对照品溶液。
3．3 阴性样品溶液的制备
按处方量除大黄的其余药材，照制备工艺制成葶苈降血脂阴性样品，取1.5g粉末，按供试品溶液制备项下的方法，制成阴性样品溶液。
3．4 线性关系考察
精密吸取对照品溶液1、2、3、4、5μl点于同一羧甲基纤维素钠硅胶G薄层板上，以法展开，测定结果，以点样量为横座标，吸收度积分值为纵座标，进行回归分析，得回归方程Y=1315.34X一7.033，相关系数r=0.9994。
3．5 稳定性试验
吸取供试品溶液2μl点于羧甲基纤维素钠薄层板上展开，每隔30min测试一次，结果表明，在120min内斑点峰面积积分值基本稳定，其RSD=1.32％。
3．6 精密度试验
同板精密度试验，依法在同一薄层板上点5个同量的同一供试品，同时点对照品溶液各1μ1，2μ1，依法操作，测定含量，RSD=3.5％。异板精密度试验，依法在五块大小相同的羧甲基纤维素钠硅胶G板上分别点上同一样品，展开后测试，RSD=2.9％。结果表明，精密度很好。
3．7 重现性试验
依正文方法对同一批号010401样品进行5次独立测定，其RSD=3.3％，说明重现性很好。
3．8 加样回收率试验
取批号010401样品，提取液大黄素含量为1.21mg／ml，共取5份，每份5ml，每份精密加入对照品溶液5ml，对照品溶液浓度为0.5mg／ml，按上述方法测定，计算回收率。其平均回收率=99.69％，RSD=0.88％。
3．9 阴性干扰试验
取上述供试品溶液、阴性样品溶液及对照品溶液，按上述条件薄层分离后，进行光谱扫描，阴性样品在供试品与对照品相应的位置无吸收峰，说明处方中除大黄外其它药材对大黄素的含量测定无干扰。
3．10 样品测定
按上述方法测定lOμl样品，计算样品中大黄素的含量。
3．11 大黄药材含量测定
取大黄药材适量，照供试品溶液的制备项下方法处理，测定大黄素的含量。
4 讨论
本品经水解后用乙醚提取4次，大黄素已基本提取*，为了更*，我们采取6次。我们对五批大黄做了含量测定，但是这还不够，大黄产地较广，大黄素的含量还有待进一步探讨。总之，经过以上试验，我们认为薄层扫描法测定葶苈降血脂胶囊中的大黄素含量是可行的。