测定护肾痛风泰颗粒中熊果酸的含量

摘要：目的：建立测定护肾痛风泰颗粒中熊果酸含量的方法。方法：采用锯齿形反射双波长薄层扫描法对熊果酸进行含量测定。结果：熊果酸在1～5μg内线性关系良好。回收率99.83％，RSD为0.41％。理论：此方法准确，灵敏度高。可作为该制剂控制熊果酸含量的方法。
关键词：护肾痛风泰颗粒；薄层扫描法；山茱萸；熊果酸
护肾痛风泰颗粒是我院疗效较确切的科研制剂，由秦艽、独活、防风、赤芍、山茱萸、威灵仙、葛根、牛膝、地龙等15种药组成。其中的山茱萸由于市场上伪品较多，而此药又较贵。故拟建立此药含量测定方法，对该制剂质量进行控制。保证药品临床疗效。
1 仪器与药品
CS-9301型双波长薄层扫描仪（日本岛津），定量毛细管（美国），939型薄层自动制板器（重庆南岸贝尔德仪器技术厂），超声波振荡器（HKD1002VS），三用紫外光灯（ZF-2）。熊果酸对照品（中国药品生物制品检定所）。硅胶G、GF254（青岛海洋化工厂），试剂均为分析纯。护肾痛风泰颗粒（本院制剂室提供）。
2 熊果酸含量测定
扫描条件选择 锯齿形反射法双波长扫描，λs=520nm，λR=700nm，灵敏度：中等，狭缝1.20mm×1.20mm。线性参数XS=3。
标准曲线制备 精密称取熊果酸对照品0.5003g，于lml容量瓶中，加无水乙醇使溶解后稀释至刻度，作为对照品溶液。精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以环已烷-氯仿-醋酸乙酯（20：5：8）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1O％硫酸乙醇溶液，在110℃加热2～5min，至呈现紫红色斑点，且斑点集中，无干扰。在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法进行扫描，测定各斑点的吸收度值。得回归方程为Y=18168X+5589，r=0.9989，点样量在1～5μg内线性关系良好。
稳定性试验精密吸取对照品溶液4μl，按标准曲线制备项下方法操作，显色后每隔10min连续扫描2次，取1h内测定结果，RSD=1.2％（n=14），结果表明，斑点面积积分值在1h内不变。
精密度试验 在同一薄层板上精密点相同量的对照品溶液5个点，按标准曲线制备项下方法操作，测定，RSD为1.81％，表明精密度符合薄层扫描的要求。
样品的含量测定 取本品约10g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚适量．加热回流提取4h，提取液回收乙醚至干，残渣用石油醚（3O～6O℃）浸泡2次，每次15ml（约浸泡2min），倾去石油醚，残渣加无水乙醇-氯仿（3：2）混合液微热使溶解，转移至5ml量瓶中。并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。．按照薄层色谱法。吸取供试品溶液5μl，对照品溶液2μl、4μl，分别交叉点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以环乙烷-氯仿-醋酸乙酯（20：5：8）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1O％硫酸乙醇溶液，在110℃加热2～5min，至呈现紫红色斑点，且斑点集中，无干扰。用外标二点法。按标准曲线项下操作方法测定。得测定结果。
由表可见6批样品熊果酸平均含量为0.0366％，样品的RSD为1.35％。由于药材的原因。熊果酸的含量有所不同，故确定本品熊果酸含量应不低于0.0358％。
样品回收率试验 取已知含量的供试品溶液6份，准确加入熊果酸对照品，按供试品制备和薄层扫描方法测定回收率99.83％，RSD=0.41％。6批样品的含量范围为0.0358％～0.0372％。
3 讨论
羧甲基纤维素钠硅胶G板厚0.3—0.4mm，由于加入粘合剂，又是用硫酸显色，故ll0"C时易熏黑，干扰结果，操作时加热时间不宜过长。
硅胶板活化后要放入干燥器内1～2h后再用，切不可活化后马上用，易造成展开后的斑点抒散成指印形，或Rf值不一致，扫描时扫进杂质，结果不准。展距以15cm为好，晾干30min以上。