测定葛根及其制剂正心泰胶囊中葛根素的含量

摘要：目的：测定葛根（野葛、粉葛）及其制剂正心泰胶囊中葛根素的含量。方法：采用毛细管电泳法, 双氯灭痛为内标物。测定条件为:运行缓冲液:30mmol/L硼砂缓冲溶液（PH:9.37） ;操作电压30kv,紫外检测波长254 nm。结果:葛根素的线性范围为10～ 100μg/ml,葛根的平均回收率为97.53% （RSD:2.1% ,n=5）;正心泰胶囊平均回收率为:102.31%（RSD:1.7% ,n=5）。结论:该方法简便、快捷, 具有良好的精密度、回收率和线性关系,结果满意。
关键词：毛细管电泳;葛根素;正心泰胶囊
正心泰胶囊是由黄芪、葛根、槲寄生等提取与川芎相混经干燥而成,具补气活血、通脉益肾之功效,用于冠心病、心绞痛。葛根素的含量测定原部颁标准中采用的是经薄层分离、紫外分光光度法,与之相比毛细管电泳法（HPCE法）具有分析周期短、消耗溶剂少、费用低、抗污染能力强的优点, 适宜于葛根及其制剂中葛根素的快速定量分析。本文以双氯灭痛为内标测定了葛根及其制剂正心泰胶囊中葛根素的含量。
1　仪器和试剂
Beckman P?A system 5000 型毛细管电泳仪（ 美国Beckman公司）;融熔石英毛细管柱75μmX77cm。硼砂为分析纯, 甲醇为色谱纯。葛根素、双氯灭痛对照品: 中国药品生物制品检定所提供。
2　操作条件
运行缓冲液: 30mmol/L硼砂溶液;操作电压30kV ,极性由正到负, 紫外检测波长254nm,柱温25℃;采用压力进样, 进样时间5s。
毛细管冲洗方法: 开机后用0.1mol/L*溶液冲洗2min,运行缓冲液2min。每次测定之间运行缓冲液冲洗1 min。
3　测试溶液的制备
3. 1　对照品贮备溶液的制备
精密称取葛根素对照品12.5mg, 用甲醇定容成浓度为0.5mg/ml的对照品溶液。
3. 2　内标溶液的制备
精密称取双氯灭痛一定量, 加甲醇配成360μg/m1的溶液,备用。
3. 3　样品溶液的制备
3. 3. 1　取葛根生药粉适量,精密称定,精密加入内标溶液25ml、甲醇25ml,称定重量,超声处理1h,放冷,加甲醇补足重量,静置,取上清液作为样品溶液。
3. 3. 2　取正心泰胶囊10粒,倾出内容物,研细,混匀,精密称取0.1g,精密称定,精密加入内标溶液25ml、甲醇25ml,称定重量,超声处理lh,放冷,加甲醇补足重量,静置,取上清液作为样品溶液。
3. 4　阴性溶液的制备
按处方比例和正心泰胶囊制备工艺制成不含葛根的正心泰胶囊,照样品溶液制备方法制备阴性液。
4　结果
4. 1　电泳行为
在本文操作条件下,葛根素,双氯灭痛分离良好,阴性溶液与对照品溶液峰及内标溶液峰没有重叠。
4. 2　线性范围
精密吸取葛根素对照品贮备溶液0.2, 0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2.0ml置于10ml容量瓶中,加入内标溶液5.0ml,再加甲醇至刻度, 摇匀。以对照品质量浓度x（μg/ml）为横坐标,以对照品的校正峰面积（对照品峰面积?内标物峰面积） 之比Y为纵坐标, 计算回归方程。葛根素的质量浓度在10～100μg/ml范围内与校正峰面积成线性关系,相关系数r=0.9998,表明方法的线性关系良好。回归方程:Y= 0.006211+0.01938X，r= 0.9998。
4. 3　精密度
取低、中、高三个质量浓度的葛根素对照品溶液加入一定量的内标溶液,连续进样3次,校正峰面积的日内精密度RSD在1.6%以内,日间精密度RSD在1.8%以内。
4. 4　重现性及稳定性试验
取同一葛根及正心泰样品分别测定五次, RSD%分别为2.65%,2.46%。说明本方法具有较好的重现性。分别制取葛根及正心泰样品供试液,每小时测定一次,共五次,RSD%分别为2.03%,2.49%,说明样品供试液在5h内具有较好的稳定性。
4. 5　回收率试验
向已知含量的葛根供试液及正心泰成药的阴性供试溶液中,精密加入不同量的葛根素对照溶液,如法测定,计算回收率。
4. 6　样品测定
取不同批次正心泰胶囊以及野葛和粉葛,依法测定。
5　讨论
5. 1　分离条件的选择:葛根与正心泰的样品溶液中,有一未知组分干扰葛根素的分离测定,为此考察了硼砂缓冲溶液的pH值和浓度对分离的影响。结果显示,在pH7.5～9.5的范围内,缓冲溶液的pH 对分离无显著影响,而硼砂的浓度对分离影响显著,当硼砂浓度增加到30mmol/L时,可产生良好的分离,故确定30mmol/L硼砂溶液为运行缓冲液。
5. 2　野葛中葛根素含量（18.79～25.46mg/g）明显高于粉葛（0.824～14.32mg/g ）,而且野葛的质量相对稳定, 粉葛的品质不一,葛根素含量变化很大。
5. 3　由试验结果分析, 正心泰胶囊中加的是野葛。
参考文献
1 陈勇川, 董慧.毛细管电泳法测定麻附胶囊中麻黄碱和伪麻黄碱的含量.中成药,1999,21（3）:117.
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