测定三种槐叶中芦丁的含量

摘要：目的：为开发利用槐叶天然资源提供参考依据。方法：用紫外分光光度法测定了三种槐叶中芦丁的含量，采用510nm波长，相关系数r=0.9996，回归方程C=0.073A+0000。结果：国槐、刺槐、龙爪槐三种槐叶均含有一定量的芦丁，国槐为2.294％，刺槐为3.329％，龙爪槐为2.084％。结论：三种槐叶以刺槐中芦丁含量zui高，具有一定的开发价值。
关键词：紫外分光光度法；槐叶；芦丁；含量测定
芦丁（Rutin）主要是从豆科植物槐（Sephora japonica L．）的花蕾中提取。近年来，随着芦丁的医药应用的广泛化，花蕾提取已远远不能满足市场所需。全国各地有着丰富的刺槐资源，龙爪槐也有部分种植。为了开发新的芦丁来源，本实验进行了，国槐（Sephora japonica L．）、刺槐（Robinia pseudoacacia L ）、龙爪槐（Sophora iaponica L．f．pendula Loud．Arb．Brit）三种槐叶中芦丁含量的测定。采用紫外分光光度法。以期为拓宽芦丁的天然来源以及槐叶的开发利用提供参考依据。
1仪器与试剂
S54紫外分光光度计（上海棱光），超声波振荡提取器（昆山，KQ-500E）；芦丁对照品由中国药品生物制品检定所提供（供含量测定用），批号：0080-9705。所用试剂均为分析纯（AR）。三种槐叶采自泰山医学院院内，采摘时间为2003年5月16日，自然阴干。
2 方法与结果
2．1 对照品溶液的制备 ．
精密称取105℃ 干燥至恒重的芦丁对照品10mg，置100ml容量瓶中，用甲醇50ml溶解，蒸馏水定容至刻度，摇匀，即得。浓度为0.2mg／ml。
2．2 线性关系的考察
精密吸取对照品溶液0，1，2，3，4，5，6ml，置25ml容量瓶中，加蒸馏水至6ml，加5％亚硝酸钠1ml，摇匀，静置6分钟，加10％硝酸铝1ml，摇匀，静置6分钟，加4.3％*10ml，加蒸馏水至刻度，静置15分钟，用紫外分光光度计测定吸收度，检测波长510nm。以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，计算机显示回归方程为：C=0.073A+0.000，相关系数r=0.9996。表明浓度在0.008～0.048mg/ml范围内具有良好的线性关系。
2．3 样品的测定
精密称取各干燥槐叶10g，粉碎过40目筛，加50℃左右的热水100ml，硼眇少许，氢氧化钙水溶液调pH值8～9，超生波振荡提取2次，每次10分钟，超声波频率为500 W，提取温度为60℃，合并2次滤液，加浓硫酸调pH值3～4，放置4小时，移人冰箱中冷藏过夜。抽滤，水洗沉淀至中性，沉淀移人烧杯中，加无水甲醇100ml，水浴加热，待溶解后，加活性炭少量，继续加热10分钟，趁热过滤，滤液放冷至室温。精密量取样液10ml，置100ml的容量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密吸取3m1置25m1容量瓶中，按2．2项下方法测定吸收度，按干品计算三种槐叶中芦丁含量。
2．4 稳定性试验
取2号样液，按2．2项下测定吸收度，每隔15分钟测定1次，计算均值及RSD，结果表明样液在75分钟内稳定。
2．5 加样回收试验
取已测知含量的2号样液5份，分别加入芦丁对照品，按2．2项下方法测定，计算回收率及RSD。
3 讨论
3．1 目前对于植物中芦丁的含量测定方法主要有液相色谱法、紫外分光光度法等常用方法。本实验曾经设计采用液相法，但提取液粘度大，难以处理成符合液相色谱法进样条件的样液。借鉴《中华人民共和国药典》2000年版紫外分光光度法测定槐米中芦丁含量的方法进行实验研究。并改煎煮法、索氏提取法为超声波提取法。通过对三种槐叶中芦丁含量的测定，证明该方法的系统稳定性、精密度及回收率符合要求，紫外分光光度法可以用于槐叶中芦丁的含量测定。
3．2 同一原植物来源不同的部位化学成分的种类以及含量、同一部位不同的采收时间同一种成分的含量均有不同。本实验研究结果表明国槐、刺槐、龙爪槐三种槐叶中均含有较高含量的芦丁，比文献报道的高，其中，以刺槐叶芦丁含量zui高。
3．3 通过本实验，为进一步扩大芦丁的天然来源提供参考，同时，为进而开发槐叶制剂奠定一定的基础。
参考文献：
[1] 中华人民共和国药典委员会．（中华人民共和国药典）[M]．一部．2000．
[2] 钱彦丛，刘景东，戎文慧，等．薄层扫描法测定龙爪槐叶中的芦丁含量[J]．基层中药杂志，2002，16（1）：26—27．