研究人员普遍认为实验室常用的塑料制品都有惰性，但有研究报道指出，诸如移液器吸头和样品管等常用实验耗材会浸出油酸酰胺、芥酸酰胺和DiHEMDA 等化合物。对于生化细胞分析和生物细胞分析而言，这是一个需要考虑的重要因素，因为浸出化合物会对此类实验产生抑制作用。
简介
移液器吸头用于实验室液体转移应用，包括取样、培养基制备和稀释等。但在标准操作过程中，移液器吸头会释放出生物活性污染物，对蛋白质活性产生负面影响，同时，实验室常用的塑料制品会释放出干扰性浸出物。
常见的迁移化合物包括油酰胺、芥酸酰胺、DiHEMDA DiHEMDA(双(2- 羟乙基) 甲基十二烷基氯化铵)和bDtBPP(双(2,4- 二叔丁基苯基) 磷酸酯)。
在本研究中，对赛多利斯Optifit 和Safetyspace® 滤芯吸头及其低吸附型号使用无水乙醇及DMSO 萃取后采用HPLC、GC-MS和LC-MS法进行实验室设备相关浸出物分析。
方法
实验室设备相关的浸出物测试使用100 μl 的乙醇或DMSO浸润各种移液器吸头(200 μl Optifit 吸头、Safetyspace® 滤芯吸头和低吸附型号，将溶剂吸入移液器吸头，保持5 秒钟并直接排液到样品试管中。多个同型号移液器吸头(5 个移液器吸头，总共500 μL，混合样品)用于生成足以使用GC-MS 或LC-MS 进行实验室设备相关浸出物分析的检测量。
GC-MS
通过液-液萃取制备乙醇和水提取物，并进样至色谱柱。通过使用内标2 - 氟联苯(10 μg/ml)进行液体注射，使用甲苯-d8(0.1μ g/ml)进行顶空注射，进行半定量。
LC-MS
将乙醇和DMSO 提取物直接进样至带色谱柱的LC-MS 系统。通过目视比较样品的基峰离子(BPI)色谱图进行评估。
结果
对赛多利斯Optifit 吸头和Safetyspace® 滤芯吸头及其低吸附型号进行了GC-MS 和LC-MS 分析。
图1. 使用GC-MS 对赛多利斯移液器吸头无水乙醇萃取的化学浸出物进行分析。
图2.使用LC-HRMS(ESI+)对赛多利斯移液器吸头无水乙醇萃取的化学浸出物进行分析。
图3.使用LC-HRMS(ESI-)对赛多利斯移液器吸头DMSO萃取的化学浸出物进行分析。
图4.使用LC-MS(ESI+)对赛多利斯移液器吸头无水乙醇萃取的化学浸出物进行分析。
结论
从赛多利斯移液器吸头中定量的浸出物水平低于文献中报告的每种评估化合物的相关浓度(表1)。因此，在细胞培养实验室操作或生物分析样品的制备中使用赛多利斯Optifit 吸头和Safetyspace® 滤芯吸头及其低吸附型号预计不会对敏感的生物或生化分析产生干扰。
宠粉钜惠在继续，满额享好礼！
手机版
制药网手机版
制药网小程序
官方微信
公众号：zyzhan
直播中 
预告 
预告 
