本文件规定了牙膏对去除外源性色斑效果的实验室测试方法的原理、试剂和材料、仪器设备、测定步骤、结果计算等内容。本文件适用于牙膏采用物理机械磨擦方法，对外源性色斑去除效果测定。对于具有漂白和光学增白效果的产品，测定时考虑本文件的适用性。

测试原理：

唾液在口腔内会在牙齿表面形成恒定的一层附着力强的薄膜，部分细菌在牙齿上分解食物或日常饮食带有深色的食物、饮料(红茶、酱油、巧克力、咖啡等）会使该薄膜着色，逐渐积累形成较难去除的外源性色斑。本方法采用牛牙作为底物，经切割、树脂镶嵌、抛光制成规则磨块，将其人工染色获得外源性色斑，模拟刷牙后利用色差计测量牙齿白度变化差异，计算牙膏对外源性色斑的相对清洁率。

仪器与设备

               SMY-01牙磨块刷磨仪                                SY-01牙磨块染色仪

1刷磨仪:V8刷磨仪或L8-II刷磨仪或其他等效产品。刷磨仪机位至少8个,刷磨载荷及次数可调，刷磨载荷可控（精度0.1 g）。

2分析天平:感量为0.01 g。

3染色装置:具有与电动机相连的转轮，转轮上有可以容纳牙磨块的载具，转轮下方配有一定容量的水槽，转轮转速大于等于2 r/min。配备2个功率为60 W的加热灯泡。染色装置相关示例见附录B.

4色差计:可以测试物体白度的L值，精度不小于0.1。

5低速精密切割机:转速范围（O~300) r/min，且配有精密千分尺。

6磨抛机:具有连续型号的碳化硅研磨盘（最细600目）。

测定步骤

牙模块的制备

1牛牙筛选及保存

挑选牛牙(5.13)若干颗，要求根部无龋坏，颊侧无白垩色斑块、氟斑及肉眼可见缺陷、裂缝，牛牙的径向长度至少14 mm，牙釉质最窄处宽度至少2mm，刮除所有软组织残留物，贮存于0.1%麝香草酚溶液或其他具有消毒作用但不改变牙齿物理性质的中性溶液内。

2牙釉质块的制备和镶嵌

用低速精密切割机切除牛牙根部后，将牛牙釉质部分切割成若干约5mm×5mm×2mm的牙釉质块。将牙釉质块放入模具中，釉质面朝外，倒入义齿基托树脂使牙釉质块被包埋，且液面与模具厚度相平，待树脂凝固后即制成牙磨块。

注:相关示例见附录C。牙釉质块的规格根据色差计孔径规格而定，牙釉质块大小覆盖色差计的测量孔。

3 牙磨块的抛光

水冷条件下，在磨抛机上使用180目砂轮将牙磨块釉质面打磨至露出，且牙磨块上下表面水平，再使用600目砂轮抛光30s至表面光滑。制备好的牙磨块保存于水中备用。

注:若牙釉质中出现淡黄色区域表明磨蚀过度，需舍弃该牙磨块。

4牙磨块的酸蚀

将抛光后的牙磨块置于烧杯中，加入1%盐酸溶液确保液面浸没牙磨块，用玻璃棒搅拌60s，用水冲洗3次，然后依次用饱和碳酸钠溶液和1%植酸溶液按上述步骤进行处理。

注:经过酸蚀的牙磨块在当天开始染色。

2染色

将酸蚀后的牙磨块放入染色装置的样品槽中,将染色装置的转速调为2r/min，打开加热灯泡，加入染色液至染色装置的染液池中，确保液面浸没一排的样品槽。染色2天后，将牙磨块从样品槽中取出，用水将牙磨块表面污物冲洗干净，用纸擦干表面水分。目测挑选牙釉质染色均匀的牙磨块，于10分钟内用色差计测量牙釉质的白度值L。若牙釉质白度值L达不到40~50范围则继续进行染色;若牙釉质白度值L小于40则舍弃。染色完成后，将牙磨块保存于水中备用，保存时间不宜超过2周。

注:染色过程中染色液因蒸发逐渐减少，24h后更换新配制的染色液并确保液面浸没一排的样品槽。

3牙磨块的分组

选取16个染色完成后的牙磨块用纸擦干表面水分，进行随机分组，样品组和对照组分别8个牙磨块。用色差计测量牙釉质的白度值(Lw)，采用t检验分析样品组和对照组的牙釉质白度值(L”前），要求组间差异无统计学意义(P>0.05）。

4 牙膏浆液制备

称取样品牙膏600g(精确至0.01g)于2000mL的烧杯中，加入960g的水用玻璃棒搅拌分散后，用电动搅拌器连续搅拌15min。

5刷磨处理

将标准牙刷和牙磨块(7.3)装刷磨仪(6.1)上，调节牙刷对牙磨块的垂直压力为150g+2g，然后设置刷磨仪(6.1)的往返频率为100r/min。往样品组和对照组的浆料杯中分别加入牙膏浆液(7.4)和对照磨擦剂浆液（5.22)，每个浆料杯中加入等体积浆液，保证浆液浸没牙磨块。启动刷磨仪，往返刷牙600次。

刷磨结束后,将牙磨块取下用水冲洗3次至无可见牙膏浆残留,用纸擦干表面水分,用色差计于10min内测量牙釉质白度值（L后）。

注:每次试验时都需要更换新牙刷。少量样品可能出现沉降现象，在刷磨中途进行牙膏浆的搅拌。