《中国药典》2025年版公示稿“1101无菌检查法”与《中国药典》2020年版“1101无菌检查法”相比，调整了冲洗量要求，删除“最高不得超过1000mL”的过渡要求，调整为“每张滤膜冲洗一般也不得超过5次，每次冲洗量为100mL”。

倾注法：取制备的供试液1mL,置直径90mm的无菌平皿中，加入1mL酶，注入15~20mL温度不超过45℃熔化的胰酪大豆胨琼脂或沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养。

涂布法：取1mL酶，置直径90mm的无菌平皿中，注入15~20mL温度不超过45℃熔化的胰酪大豆胨琼脂或沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，制成平板。每一平板表面接种制备的供试液不少于0.1mL，涂布，倒置培养。

薄膜过滤法：同涂布法制备含酶平板。分别在润膜液、最后一瓶冲洗液中各加入1mL酶，冲洗完毕后，取膜、贴膜至含酶的胰酪大豆胨琼脂培养基或含酶的沙氏葡萄糖琼脂培养基上，以去除滤膜内部缓释出的微量抑菌性物质，确保微生物限度检查结果的可靠性。

注：该方法仅供参考，供试品的微生物限度方法以计数方法适用性试验为准。

可将酶添加于环境监测的培养基中，灭活生产车间时抗生素生产时落下的药物粉尘，确保环境监测结果准确可靠。