产品推荐:原料药机械|制剂机械|药品包装机械|制冷机械|饮片机械|仪器仪表|制药用水/气设备|通用机械

技术中心

制药网>技术中心>本期话题>正文

欢迎联系我

有什么可以帮您? 在线咨询

纯化小技巧 | MaXtar® COLL 400/700病毒应用分享

来源:百林科医药科技(上海)有限公司   2024年05月30日 13:19  
 

 

百林科多模式层析填料家族中
 
有这么一类特殊的填料,凭借其独特的填料结构
 
发挥凝胶过滤吸附层析的双重特性
 
专为超大分子设计。
 

 

 
  包括MaXtar® COLL 400、MaXtar® COLL 700两种,分别适用于分子量超过400 KD和700 KD的超大分子
 
  MaXtar® COLL 400/700产品简介  
 
  独特的双层结构设计,外壳是多孔的钝化层 ,确保 400 KD或700 KD 以上的大分子不会进孔,直接走外水流穿;核心是偶联了同时具有疏水和吸附负电荷作用基团的球形内核,最大程度结合宿主蛋白、 核酸等杂质。具有明显优势:
 
  • 以流穿模式处理400 KD 或700 KD 以上的大分子,工艺优化更容易,更方便线性放大。
 
  • 改良的MaXtar® 基架具有更强刚性,因此在较低的反压下能够实现更高工艺流速,提高工艺效率。
 
  • 相比于传统的凝胶过滤层析,拥有更大的上样量,更高流速,生产效率大大提升。
 
  • 耐受范围广,化学稳定性好。
 
  • 适用于病毒及类病毒颗粒等生物大分子分离。
 
  如何选择MaXtar® COLL 400/700  
 
  • MaXtar® COLL 400:如有病毒/大分子在MaXtar® COLL 700上收率不佳,有明显吸附现象,可尝试选择更小孔径的MaXtar® COLL 400进行优化。
 
  • MaXtar® COLL 700:主要适用分子量大于700KD(约30nm)的病毒/大分子。
 
  MaXtar® COLL 400/700应用案例分享  
 
案例一:MaXtar® COLL 400在VLP的应用
 

 

 
图1:MaXtar® COLL 400纯化VLP图谱 
样品:VLP(单体60kDa,120聚体) 
柱体积:30ml 
上样量:300ml 
流速:7ml/min
 

表1:MaXtar® COLL 400纯化结果

 
  小结:结合层析图谱和胶图可见,纯度有明显提高,杂质去除明显。
 
案例二:MaXtar® COLL 700在慢病毒中的应用
 
  建议测试的工艺条件
 
  样品信息:浓缩后样品
 
  平衡Buffer20 mM PB,150 mM NaCl ,pH 7.5或1×DPBS,pH 7.5
 
  CIP Buffer1 M NaOH,30%异丙醇

图2:MaXtar® COLL 700纯化慢病毒图谱

 

表2:MaXtar® COLL 700纯化结果

 
  小结:回收率和杂质去除水平,均符合预期。
 
  MaXtar® COLL 400/700应用过程中的Tips  
 
  ◆ 为最大程度发挥COLL系列内部的多种配基吸杂效果,建议在缓冲液中添加100~150mM NaCl;
 
  ◆ 由于杂质与内部配基之间的高效多模式结合,需要对填料进行有效清洁,建议使用1M NaOH, 30%异丙醇。
 
  ◆ 不推荐使用柠檬酸盐缓冲液,因为柠檬酸离子会与配基相互作用。

 

百林科多种层析填料
均可申请试用,
扫描立刻申请样品
 

  BioLink  

免责声明

  • 凡本网注明"来源:制药网"的所有作品,版权均属于制药网,转载请必须注明制药网,https://www.zyzhan.com。违反者本网将追究相关法律责任。
  • 企业发布的公司新闻、技术文章、资料下载等内容,如涉及侵权、违规遭投诉的,一律由发布企业自行承担责任,本网有权删除内容并追溯责任。
  • 本网转载并注明自其它来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
  • 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。

企业未开通此功能
详询客服 : 0571-87858618