酵母培养基的配制

一、目的要求 
    了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。 
学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。 
二、基本原理 
    麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基，马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基，而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。 
三、实验材料 
（一）药品 
葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O，FeS04、琼脂。 
（二）仪器 
天平、高压蒸汽灭菌锅。 
（三）玻璃器皿 
移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。 
（四）其他物品 
药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。 
四、实验内容 
（一）麦芽汁培养基的配制 
1．培养基成分 
新鲜麦芽汁一般为10-15波林。 
2．配制方法 
    （1）用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h，置于15℃阴凉处发芽，上盖纱布，每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用。 
    （2）取一份麦芽粉加四份水，在65℃水浴锅中保温3-4h，使其自行糖化，直至糖化*（检查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化*）。 
    （3） 糖化液用4-6层纱布过滤，滤液如仍混浊，可用鸡蛋清澄清（用一个鸡蛋清，加水20 m1，调匀至生泡沫，倒入糖化液中，搅拌煮沸，再过滤）。 
   （4）用波美比重计检测糖化液中糖浓度，将滤液用水稀释到10-15波林，调pH至6．4。如当地有啤酒厂，可用未经发酵，未加酒花的新鲜麦芽汁，加水稀释到10-15波林后使用。 
    （5）如配固体麦芽汁培养基时，加入2％琼脂，加热融化，补充失水。 
    （6）分装、加塞、包扎。 
    （7）高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。 
（二）马铃薯葡萄糖培养基的配制 
1、培养基成分 
马铃薯                                             20g 
葡萄糖                                             2 g 
琼脂                                               1.5-2g 
水                                                 100ml 
自然pH                                              
    2．配制方法 
    （1）配制20％马铃薯浸汁  取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000m1。80℃浸泡lh，用纱布过滤，然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20％马铃薯浸汁，贮存备用。 
（2）配制时，按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖，加热煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化并补足失水。 
    （3）分装、加塞、包扎。 
    （4）高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。 
  （三）豆芽汁葡萄糟培养基的配制 
1．培养基成分 
黄豆芽                                             10g 
葡萄糖                                             5g 
琼脂                                               1.5-2g 
水                                                 100ml 
自然pH                                               
    2．配制方法 
    （1）称新鲜黄豆芽10g，置于烧杯中，再加入100 m1水，小火煮沸30 min，用纱布过滤，补足失水，即制成10％豆芽汁。 
（2）配制时，按每100 m1 10％豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2 g琼脂，继续加热融化，补足失水。 
    （3）分装、加塞、包扎。 
    （4）高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。 
 （四）察氏（czapck）培养基的配制 
1．培养基成分 
蔗糖                                             3g 
NaN03                                           0.3g 
K2HP04                                                                0.1g 
KCl                                             0.05g 
MgSO4·7H2O                                     0.05 g 
FeS04                                                                     0.001 g 
琼脂                                           1.5-2g 
蒸馏水                                         100ml 
自然pH                                                  
2．配制方法 
 （1）称量及溶化  量取所需水量约2／3左右加入到烧杯中，分别称取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培养基加入1ml 0.1％的FeS04溶液。 
（2）定容  候药品全部溶解后，将溶液倒入量筒中，加水至所需体积。 
（3）加琼脂  加入所需量琼脂，加热融化，补足失水。 
（4）分装、加塞、包扎。 
（5）高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。 
五、实验报告内容 
记录你所配制培养基的名称及成分。