Western Blot实验利器:WB双板与铂乐通用转印电泳槽使用全解析
以下是天津本生关于WB双板与铂乐通用转印电泳槽的深度解析及操作指南:
一、核心设备特性对比
参数 WB双板转印槽 铂乐通用型
转印模式 湿转(需冰浴) 兼容湿转/半干转
电极材质 铂金电极丝(间距40mm) 铂金涂层电极(耐腐蚀)
通量设计 双板同步转印(8.3×7.3cm×2) 单板设计,适配伯乐Mini-PROTEAN系统
缓冲液消耗 1600mL(湿转) 湿转1000mL/半干转200mL
二、关键操作流程
(1)WB双板湿转步骤
三明治组装
按顺序放置:黑色夹板→海绵垫→滤纸→凝胶→PVDF膜(甲醇激活)→滤纸→海绵垫
每层需用滚轮驱除气泡,膜与胶剪角标记方向
电泳条件
200mA恒流转印2小时,冰浴维持4℃环境
缓冲液配方:甘氨酸14.4g + Tris-base 3.03g + 甲醇200mL + 水800mL(4℃预冷)
(2)铂乐半干转优化
滤纸/膜尺寸需比凝胶小1-2mm以提升效率
推荐参数:15V恒压转印30分钟(20-100kD蛋白)
三、常见问题解决方案
转印不完整
检查电极接触(铂金电极需定期清洁)
大分子蛋白(>100kD)优先选用湿转模式
背景过高
PVDF膜甲醇激活时间控制在10-15秒,避免过度干燥
转印全程佩戴手套防止蛋白污染
四、设备维护要点
电极保养:使用后以超纯水冲洗,避免盐结晶腐蚀
密封圈检查:定期更换老化硅胶垫防止漏液
五、选型建议
高通量需求:本生垂直电泳槽(双板)(BS-mini01)
灵活性需求:垂直电泳槽(四板) 通用型适配多种转印场景
BS-300 基础性电泳仪电源
BS-600C 通用型电泳仪电源
BS-mini01 垂直电泳槽(双板)
BS-mini04 垂直电泳槽(四板)
BS-ZY03 转印电泳槽(WB双板和铂乐通用)
BS-ZY04 转印电泳槽 (WB四板)
BS-sub02 琼脂糖电泳槽
注:具体参数需参考设备说明书并结合预染Marker验证转印效果。
注:以上资料仅供参考,如需完整说明书,建议联系供应商获取最新版本。
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