【微课堂】生物指示剂培养周期确定依据

确认生物指示剂在部分周期灭菌的条件，使生物指示剂在此周期中灭菌，培养7天后预期有30%～95%呈现阳性。

将待测批次生物指示剂在抗力仪中121℃灭菌16min，培养7天后，生物指示剂的阳性率为70%，认为该灭菌时间符合预期要求；假如在相同条件下，生物指示剂培养7天后的阳性率低于30%或高于95%，则认为该灭菌时间不符合预期，需要调整灭菌时间，使灭菌后生物指示剂的阳性率在30%～95%之间；表1介绍了该款生物指示剂灭菌时间的筛选过程，三批次生物指示剂在灭菌时间为16min时，阳性率在40%～65%之间，均符合要求。可以确认后续的灭菌条件为：121℃，16min。

 取3批次该产品，每批次100支生物指示剂，按照步骤（01）中确认的灭菌时间进行杀灭，即抗力仪中121℃灭菌16min。

杀灭结束后，按说明书要求进行接种操作，并转移至规定的培养条件下培养7天。按照预先确定的时间间隔，记录生物指示剂的阳性结果和阴性结果。例如，设定的时间间隔为24h，每隔24h进行结果记录，最终的培养时间结果以“h”为单位。测试结果见表2。

在相同的培养时间间隔下，3批次生物指示物阳性的数量与第7d的阳性生物指示物数量之间的相关度≥97%，即表2中“生长比例”≥97%，可以确认为最短的培养时间。计算公式如下：

由表2可知，第一次批次和第二批次指示剂在培养24h时，生长比例均＜97%，无法以“24h”作为最短培养时间；当培养时间为48h时，三批次生物指示剂的生长比例均为100%，满足标准中“≥97%”的要求，可以选择48h作为该生物指示剂的最终培养时间。因此，泰林SS6-121型自含式压力蒸汽灭菌生物指示剂的说明书标示的培养时间为48h。