Elisa实验：ELISA手工洗板五步法

　　ELISA手工洗板五步法

甩尽孔内液体‌

将酶标板垂直倒扣，快速甩出孔内残留液体，避免手腕左右摇晃导致孔间交叉污染‌。

拍干残留液‌

使用洁净的厚吸水纸拍干孔内液体，拍板时需更换吸水纸位置，避免碎屑残留‌。

加注洗涤液‌

每孔加入350μL洗涤液(现配现用，含0.05%-0.2%吐温20的PBS缓冲液)，注满孔口但避免溢出‌。

浸泡与甩干‌

静置浸泡1-2分钟(间歇摇动)，随后甩尽液体并再次拍干，重复此步骤3-5次‌。

立即进行下一步‌

拍干后需快速加入后续试剂，避免酶标板干燥导致蛋白失活(尤其高温环境下)‌。

关键注意事项

洗涤液配置‌：20倍稀释浓缩液，使用无污染蒸馏水，结晶需溶解‌。

拍板技巧‌：力度适中，避免拍断板条或拍不干净‌。

避免污染‌：高浓度孔液体可能污染相邻孔，前两遍洗涤需格外谨慎‌。

常见问题

背景偏高‌：可能因洗涤不净或拍干不充分，需增加洗涤次数至5-6次‌。

假阳性‌：扣干不净或洗涤液污染，需确保吸水纸洁净且操作连贯‌。

注意：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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