大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒实验使用说明书
以下是关于大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒的实验使用说明综合指南：
BS-3458 大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒
一、实验原理
采用双抗体夹心法测定标本中T4水平。通过纯化的大鼠T4抗体包被微孔板形成固相抗体，依次加入样本、HRP标记的T4抗体形成复合物，经TMB显色后测定450nm吸光度(OD值)，其颜色深浅与T4浓度呈正相关。
二、试剂盒组成
组分 48孔配置 96孔配置 保存条件
酶标包被板 1×48孔 1×96孔 2-8℃
标准品(270μg/L) 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃
酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃
显色剂A/B液 各3ml×1瓶 各6ml×1瓶 2-8℃
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃
浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃
三、样本处理要求
血清：室温静置2小时或4℃过夜后，1000×g离心20分钟取上清，避免反复冻融
血浆：EDTA/肝素抗凝采集，30分钟内2-8℃ 1000×g离心15分钟
组织匀浆：PBS冲洗后称重剪碎，按重量体积比1:9加入生理盐水匀浆，2000-3000转/分离心20分钟取上清
四、操作步骤
加样：标准品/样本加入对应孔，建议做复孔
孵育：37℃温育30分钟
洗涤：甩干孔内液体，每孔加满洗涤液静置30秒后甩干，重复5次
加酶标试剂：每孔50μl，37℃避光孵育30分钟
显色：依次加入显色剂A/B各50μl，37℃避光反应15分钟
终止：每孔加终止液50μl
检测：450nm波长测定OD值(建议5分钟内完成)
五、结果计算
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线
样本浓度=标准曲线对应值×稀释倍数
检测范围：0.703-45ng/ml，灵敏度0.422ng/ml
六、注意事项
试剂使用前需平衡至室温(20-25℃)
不同批号试剂不得混用
浓缩洗涤液出现结晶时需37℃溶解后使用
有效期6个月，2-8℃保存，避免反复冻融
七、技术支持
部分厂商提供免费代测服务及无效退换承诺，具体可咨询供应商。
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