小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒实验使用说明书

　　以下是关于小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒的实验使用说明综合指南：

　　BS-2016  小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒

　　一、试剂盒组成‌

　　预包被酶标板‌：96孔或48孔规格，含抗小鼠CXCR3单抗

　　标准品‌：通常为80ng/瓶或240ng/L浓度，提供2-5瓶

　　检测试剂‌：

　　酶标抗体工作液(HRP标记)

　　显色液(TMB A/B液)

　　终止液(硫酸溶液)

　　辅助溶液‌：

　　10×标本稀释液、20×浓缩洗涤液

　　封板膜、密封袋等耗材

　　二、样本处理‌

　　样本类型‌：血清、血浆、细胞上清液或组织匀浆

　　处理方法‌：

　　血清/血浆‌：1000-3000×g离心10-30分钟，去除颗粒或纤维蛋白

　　细胞上清‌：离心去除细胞碎片

　　组织匀浆‌：生理盐水匀浆后离心取上清

　　保存条件‌：-20℃分装冻存，避免反复冻融

　　三、实验步骤‌(双抗体夹心法)

　　标准品稀释‌：用标准品稀释液配制梯度浓度(如0-400 ng/L)

　　加样‌：

　　每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育1-2小时

　　洗涤‌：甩干孔内液体，加满洗涤液静置30秒，重复3-5次

　　加酶标抗体‌：每孔加入100μL HRP标记抗体，37℃孵育30-60分钟

　　显色‌：加入TMB底物避光反应15-30分钟

　　终止与检测‌：

　　加终止液(50μL/孔)后立即测定450nm OD值

　　根据标准曲线计算样本浓度

　　四、注意事项‌

　　温度控制‌：

　　试剂使用前需室温平衡20分钟，避免低温影响灵敏度

　　显色反应需严格避光

　　操作规范‌：

　　避免孔间交叉污染，使用独立枪头

　　边缘孔易出现“边缘效应”，建议弃用外周孔

　　数据有效性‌：

　　标准曲线R²应≥0.99，复孔CV值<15%

　　五、常见问题‌

　　灵敏度下降‌：可能因试剂未恢复至室温或超过有效期

　　背景过高‌：洗涤不或样本溶血导致

　　如需完整说明书或技术支持，建议联系厂商获取最新版本。

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