鸡孕酮（PROG）Elisa试剂盒说明书

　　以下是鸡孕酮(PROG)ELISA试剂盒说明书的核心内容及操作要点，综合整理自多个厂商资料及技术文档‌：

　　一、试剂盒基本信息‌

　　检测原理‌：双抗体夹心法(主流)或竞争法，通过HRP酶催化TMB显色，450nm波长测OD值定量‌。

　　检测范围‌：通常为78-5000pg/mL或100-2500pmol/L(不同品牌有差异)‌。

　　样本类型‌：适配鸡血清、血浆、组织匀浆、细胞上清等，需避免反复冻融‌。

　　二、关键组分清单‌

　　组分‌ ‌作用‌ ‌保存条件‌

　　包被微孔板 预固相化抗体，捕获抗原 2-8℃干燥保存‌

　　HRP标记检测抗体 与抗原结合，催化显色反应 避光4℃‌

　　TMB底物液 显色剂(A/B液需1:1混合) 避光4℃‌

　　终止液(稀硫酸) 终止反应，稳定黄色产物 室温‌

　　三、样本处理规范‌

　　血清/血浆‌：

　　全血室温静置2小时或4℃过夜，1000g离心20分钟取上清‌。

　　抗凝剂推荐EDTA或肝素，避免使用NaN3(抑制HRP活性)‌。

　　组织匀浆‌：

　　按1:9(重量:体积)加入PBS匀浆，5000g离心10分钟取上清‌。

　　细胞上清‌：

　　分泌性成分直接离心收集;胞内成分需反复冻融裂解细胞‌。

　　四、实验步骤概要‌

　　标准品稀释‌：冻干品用1mL稀释液复溶，梯度稀释至7个浓度(如5000pg/mL→78pg/mL)‌。

　　加样温育‌：

　　每孔依次加入样本/标准品50μL→检测抗体50μL，37℃孵育1小时‌。

　　洗涤‌：

　　使用30倍稀释的浓缩洗涤液，每孔300μL洗5次，拍干‌。

　　显色与终止‌：

　　加入TMB底物100μL，避光反应15分钟→加终止液50μL‌。

　　五、注意事项‌

　　质量控制‌：批内CV<10%，批间CV<12%为合格‌。

　　干扰规避‌：溶血、脂血样本需预处理;细菌污染易致假阳性‌。

　　数据拟合‌：建议使用四参数逻辑曲线(4PL)计算浓度‌。

　　六、技术支持‌

　　部分厂商提供代测服务(如BUNSEN本生)及实验问题咨询‌。

　　如需完整说明书，可联系供应商获取PDF文档(例：鸡孕酮检测说明书)‌。

　　注：以上资料仅供参考，如需进一步技术支持，可联系供应商获取服务或实验指导‌。