人补体因子H(CFH)ELISA试剂盒‌的实验使用说明书

　　以下是‌人补体因子H(CFH)ELISA试剂盒‌的实验使用说明书核心内容：

　　BS-0638人补体因子H(CFH)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用‌双抗体夹心法‌：

　　微孔板预包被抗人CFH抗体捕获样本中的CFH

　　加入HRP标记的检测抗体形成复合物

　　TMB显色(蓝色→黄色)，450nm测OD值，浓度与吸光度正相关

　　二、试剂盒组成

　　组分 规格(96T/48T) 保存条件

　　预包被微孔板 1×96孔/1×48孔 2-8℃

　　CFH标准品(冻干) 0.5mL×6管(0-40ng/mL) -20℃

　　HRP标记抗体 6mL/3mL 2-8℃

　　TMB底物 9mL/6mL 避光4℃

　　20×洗涤缓冲液 25mL/15mL(需1:20稀释) 室温

　　三、样本处理

　　血清/血浆‌：3000×g离心10-20分钟，避免溶血或脂血

　　组织匀浆‌：生理盐水研磨后离心取上清

　　保存要求‌：-20℃分装，避免反复冻融(≤3次)

　　四、操作步骤

　　平衡试剂‌：所有组分室温平衡20分钟

　　标准品复溶‌：加0.5mL稀释液溶解冻干标准品

　　加样温育‌：

　　依次加入标准品/样本50μL→检测抗体50μL

　　37℃孵育60分钟

　　洗涤‌：手工洗板5次(每孔加满洗涤液静置1分钟)

　　显色‌：加入TMB 100μL，避光反应15分钟

　　终止‌：加终止液50μL，10分钟内测OD450nm

　　五、注意事项

　　灵敏度‌：1.88-8.54ng/mL(不同品牌差异)

　　精密度‌：板内CV<10%，板间CV<15%

　　干扰因素‌：避免细菌污染、反复冻融或剧烈震荡样本

　　失效判断‌：阴性对照OD值≥0.12需弃用

　　六、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制曲线，样本浓度需乘以稀释倍数。建议使用生工生物或艾美捷科技等供应商提供的专业分析软件。

　　注：不同品牌试剂盒参数可能存在差异，请以实际随货说明书为准。

　　注：以上资料仅供参考，具体详情来咨询技术 老师或品牌供应商。

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