大鼠白介素27(IL-27)ELISA检测试剂盒技术说明书

　　大鼠白介素27(IL-27)ELISA检测试剂盒技术说明书

　　BS-2900大鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒

　　一、产品概述

　　本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附技术，专用于定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆及细胞培养上清中的白介素27(IL-27)。IL-27是由EBI3和p28亚基组成的异源二聚体，在免疫调节中发挥重要作用‌。

　　二、检测原理

　　固相包被‌：抗大鼠IL-27单抗预包被于微孔板。

　　复合物形成‌：样本中IL-27与包被抗体结合，加入生物素标记的检测抗体形成夹心结构。

　　酶联反应‌：加入HRP标记的链霉亲和素，与生物素结合。

　　显色测定‌：加入TMB底物显色，终止液终止反应后，在450nm波长下测定OD值，浓度与OD值呈正相关‌。

　　三、试剂盒组分

　　组分 规格 储存条件

　　预包被微孔板 96孔/48孔 2-8℃

　　标准品(冻干粉) 6个浓度梯度 -20℃

　　生物素标记抗体 100×浓缩液 -20℃

　　HRP标记链霉亲和素 100×浓缩液 -20℃

　　TMB显色液 避光保存 2-8℃

　　终止液(2M硫酸) 室温 避光

　　浓缩洗涤液(20×) 需稀释 室温

　　样本稀释液 即用型 2-8℃

　　四、样本要求

　　样本类型‌：

　　血清/血浆：EDTA抗凝，离心后取上清。

　　组织匀浆：生理盐水匀浆，离心取上清。

　　细胞上清：离心去除细胞碎片。

　　保存条件‌：

　　短期(≤7天)：2-8℃。

　　长期(>7天)：-20℃或-70℃，避免反复冻融‌。

　　五、实验步骤

　　1. 标准品配制

　　用样本稀释液复溶冻干标准品，稀释至6个浓度梯度(如1000、500、250、125、62.5、0 pg/mL)。

　　2. 加样与孵育

　　每孔加入100μL标准品或样本，37℃孵育90分钟。

　　洗涤5次，每次300μL洗涤液，拍干。

　　3. 抗体反应

　　加入100μL生物素标记抗体，37℃孵育60分钟。

　　洗涤后加入100μL HRP标记物，37℃孵育30分钟。

　　4. 显色与终止

　　加入90μL TMB底物，避光孵育15-20分钟。

　　加入50μL终止液终止反应‌。

　　5. 检测

　　酶标仪450nm波长测定OD值。

　　六、结果计算

　　以标准品浓度为横坐标(X)，OD值为纵坐标(Y)，绘制标准曲线。

　　样本浓度根据OD值从标准曲线中读取，若超出范围需稀释后复测‌。

　　七、技术参数

　　参数 指标

　　检测范围 15.6-1000 pg/mL

　　灵敏度 ≤5.7 pg/mL

　　精密度(批内/批间) CV <10%/CV <12%

　　回收率 血清91%、EDTA血浆93%、肝素血浆94%

　　八、注意事项

　　试剂保存‌：

　　未开封试剂盒：-20℃保存1年。

　　开封后：4℃保存1周，长期需分装-20℃。

　　操作规范‌：

　　避免溶血、脂血样本。

　　洗涤需净，拍干后立即下一步。

　　终止液为酸性，需防护皮肤和眼睛‌。

　　质量控制‌：

　　每批实验设空白孔和标准曲线，R²需>0.95。

　　样本稀释后需重新检测。

　　九、常见问题

　　OD值过高‌：样本浓度过高，需稀释。

　　显色不均‌：检查洗涤或加样准确性。

　　线性差‌：重新配制标准品或更换试剂‌。

　　十、适用范围

　　本试剂盒仅供科研使用，不可用于临床诊断‌。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

　　大鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒实验使用说明书 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴!