小鼠硫酸转移酶(SULT)ELISA检测试剂盒技术说明书

　　小鼠硫酸转移酶(SULT)ELISA检测试剂盒技术说明书

　　BS-9421小鼠硫酸转移酶(SULT)ELISA试剂盒

　　一、产品概述

　　本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，专用于定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中硫酸转移酶(SULT)的活性水平。‌仅供科研使用‌，不可用于临床诊断。

　　二、实验原理

　　双抗体夹心法‌：微孔板预包抗小鼠SULT捕获抗体，样本中SULT与其结合后，加入生物素标记的检测抗体形成“抗体-抗原-抗体”复合物。

　　酶联显色‌：加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素，催化底物TMB显色，颜色深浅与SULT浓度呈正相关。

　　定量检测‌：酶标仪450nm波长测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样本浓度。

　　三、试剂盒组成

　　组分 规格(48孔/96孔) 保存条件

　　酶标包被板 1×48/1×96 2–8℃

　　标准品(80U/L) 0.3ml×6管 2–8℃

　　酶标试剂(HRP标记) 5ml/10ml 2–8℃

　　显色剂A液 3ml/6ml 2–8℃

　　显色剂B液 3ml/6ml 2–8℃

　　终止液 3ml/6ml 2–8℃

　　浓缩洗涤液(20×) 15ml/25ml 2–8℃

　　封板膜、密封袋 2片/1个 室温

　　四、样本处理

　　血清/血浆‌：

　　室温静置10–20分钟，2000–3000转/分离心20分钟，取上清液。

　　避免反复冻融，建议分装后-80℃保存。

　　组织匀浆‌：

　　组织加入生理盐水捣碎，1000×g离心33分钟，取上清液。

　　细胞上清液‌：

　　1000×g离心32分钟去除颗粒，取澄清液。

　　五、实验步骤

　　标准品稀释‌：用标准品稀释液将标准品梯度稀释为6个浓度点(80–0 U/L)。

　　加样与温育‌：

　　每孔加入100μL标准品/样本(建议复孔)。

　　37℃避光温育90分钟。

　　洗涤‌：弃去孔内液体，用洗涤液浸泡30秒后拍干，重复3次。

　　显色与终止‌：

　　每孔加入显色剂A/B液各50μL，37℃避光显色15分钟。

　　加入终止液50μL终止反应。

　　检测‌：酶标仪450nm波长测定OD值，通过标准曲线计算样本浓度。

　　六、注意事项

　　试剂平衡‌：冷藏试剂需室温平衡15–30分钟后再使用。

　　操作规范‌：

　　避免气泡产生，加样时贴壁缓慢加入。

　　浓缩洗涤液如有结晶，可水浴加热助溶。

　　安全防护‌：

　　终止液含强酸，需佩戴手套操作。

　　实验区域禁止饮食、吸烟。

　　质量控制‌：

　　每板需设空白孔和标准曲线孔。

　　板内/板间变异系数应<10%。

　　七、结果计算

　　以标准品浓度(U/L)为横坐标，OD值为纵坐标绘制四参数拟合曲线。

　　样本浓度=曲线方程OD值代入结果×稀释倍数。

　　八、保存与有效期

　　未开封试剂盒：2–8℃保存6个月。

　　已开封酶标板：密封袋装2–8℃保存≤1个月。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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