齐一生物人胃蛋白酶原A(PGA)检测试剂盒齐一生物科技(上海)有限公司专业经营ELISA试剂盒产品种类齐全,质量可靠,*,灵敏度高,效果稳定,易保存,操作简单.到货快,确保每一个ELISA试剂盒质量.凡是购买齐一生物科技有限公司ELISA试剂盒免费代测,提供技术服务,5个工作日出实验结果.欢迎新老客户前来:
齐一生物人胃蛋白酶原A(PGA)检测试剂盒操作步骤:
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉.(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1200 ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L).
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔.在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍).加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀.
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟.
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用.
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干.
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外.
7.温育:操作同3.
8.洗涤:操作同5.
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色).
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值). 测定应在加终止液后15分钟以内进行.齐一生物科技(上海)有限公司专业经营ELISA试剂盒产品种类齐全,质量可靠,*,灵敏度高,效果稳定,易保存,操作简单.到货快,确保每一个ELISA试剂盒质量.凡是购买齐一生物科技有限公司ELISA试剂盒免费代测,提供技术服务,5个工作日出实验结果.欢迎新老客户前来: !