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蛋白酶3抗体(PR3Ab)ELISA检测试剂盒

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  • 公司名称齐一生物科技(上海)有限公司
  • 品       牌
  • 型       号
  • 所  在  地上海市
  • 厂商性质生产厂家
  • 更新时间2015/7/21 15:05:00
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蛋白酶3抗体(PR3Ab)ELISA检测试剂盒 产品信息

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操作方法蛋白酶3抗体(PR3Ab)ELISA检测试剂盒
双抗体夹心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释蛋白质含量为1~10μg/ml.在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃隔夜.次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟.(简称洗涤,下同).
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时.然后洗涤.(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔).
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml.37℃孵育0.5~1小时,洗涤.
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟.
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml.
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示.也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性.
间接法
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃隔夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;
6.’zui后一遍用DDW洗涤.
其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6.
发展前景
临床测定技术的发展主要在于方法学的发展,而方法学的发展依托于试剂生产技术不断进步更新和型标记物的应用.分子生物学正在并zui终肯定会让对整个生命科学有一个全面而*的认识,其对免疫测定技术发展的影响也是直接而又有效的,对以前一些难以检测的生物活性物质的测定,并且大大提高了检测的灵敏度和特异性.
应用领域
ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断.也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点.不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查.本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法.因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,
可概括四个方面:
1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位.
2、研究抗酶抗体的合成.
3、显现微量的免疫沉淀反应.
4、定量检测体液中抗原或抗体成份.牛口蹄疫检测抗体检测试剂(O型)检测试剂盒    ELISA. 
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关键词:生物试剂
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