安定农残快速检测试剂盒_进口试剂盒货号RNH 94016 安定检测试剂盒 Diazepam(DIA) ELISA Test Kit 96T 美国REAGEN
REAGEN™M安定酶联免疫反应测试盒是用于饲料、肉类（牛肉、鸡肉和猪肉），牛奶，血清和尿液等中安定和其它相关的苯二氮卓类残留的定量检测。该试剂盒特点。齐一生物销售
REAGEN™安定酶联免疫反应测试盒说明书(货号：RNH94016)
1．概述
REAGEN™M安定酶联免疫反应测试盒是用于饲料、肉类（牛肉、鸡肉和猪肉），牛奶，血清和尿液等中安定和其它相关的苯二氮卓类残留的定量检测。该试剂盒特点。
- 快速(10-30分钟)，适用于多种样品的低成本提取方法，高回收率(75%以上)。
- 高灵敏度为0.005ppb。
- 高重复性。
- 检测过程只需要不到2小时。
安定农残快速检测试剂盒_进口试剂盒2．试剂盒原理
REAGEN™安定酶联免疫反应检测试剂盒基于竞争性酶联反应原理，含有安定的抗原已经包被于微孔板上。药物分析时，样品同特异性一抗共同被添加到板孔中。如果样品中含有药物，会竞争一抗，抑制抗体与板上包被的药物抗原结合。加入酶标记的二抗，形成包被抗原-抗体-酶标二抗复合物。加入底物后，产物的颜色强弱与样品中药物的浓度成反比。
3.试剂盒组成
已包被抗原的酶标板(Diazepam-coated Microtiter Plate)（可拆式） 12×8 孔
标准液(Diazepam Standards)（0、0.025、0.05、0.1、0.5、1.0 ppb） 6×1.0mL
回收用100ppb(Spiking)（可选） 1×1.0ml
安定一抗(Antibody #1) 1×12mL
100×HRP酶标二抗(HRP-Conjugated Antibody #2) 1×250µL
酶标二抗稀释液(Antibody #2 Diluent) 1×20mL
20×浓缩洗液(Wash Solution) 1×30mL
TMB底物(TMB Substrate) 1×12mL
终止液(Stop Buffer) 1×14mL
10×样品提取液(Sample Extraction Buffer) 1×25mL
本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存，有效期为一年。如果超过1个月不使用试剂盒，
请将一抗和二抗放置-20℃或者冰冻保存。
4.检测限
检测物质 | 检测下限（ng/g） |
饲料 | 0.25 |
肌肉/肝脏/肾脏 | 0.25 |
牛奶 | 0.5 |
血清 | 0.5 |
尿液 | 0.25 |
5.交叉反应
交叉反应物质 | 交叉反应（%） |
安定(Diazepam) | 100 |
氟硝基安定(Flunitrazepam) | 100 |
氯羟安定(Lormetazepam) | 100 |
海尔神(Triazolam) | 25 |
甲基三唑安定(Alprazolam)阿普唑仑 | 15 |
去甲羟安定(Oxazepam)奥沙西泮 | 1 |
甲氨二氮卓(Chlordiazepoxide)利眠宁 | <1 |
氟胺安定(Flurazepam) | <1 |
溴基安定(Bromazepam) | <1 |
氯羟去甲安定(Lorazepam) | <1 |
氧异安定(Clobazam0)氯巴詹 | <1 |
6．未提供的设备或材料
- 酶标仪
- 恒温培养箱
- 匀质器
- 漩涡振荡器
- 移液器(10、20和100mL，1mL各一支)
- 多道移液器（50-300mL）
- 乙醇
7.注意事项
实验前请阅读以下文字，以保证获得实验效果。
- 标准品中含有安定，请小心使用。
- 不要使用过期的试剂盒。
- 不同批次的试剂盒不要混用，抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。确保二抗及二抗稀释液正确配制。
- 尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。同样的，不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫若干纸巾或者其他物料。
- 水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。
- 加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。
- 孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的*性，先添加标准品后添加样品。
- 从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。
- 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。
8．试剂的准备
所有的试剂在使用之前应将其回温室温，并在使用试剂前摇动几下，以保证合理的浓度。
（1）1×二抗工作液
按1：99的比例配制酶标二抗和二抗稀释液，配成二抗的工作液。
（2）1×工作洗液
按1：19的比例配制浓缩洗液和蒸馏水。
（3）1×样品提取液
按1：9的比例配制样品提取浓缩液和蒸馏水。
（4）35%乙醇/样品提取液（用于检测牛奶，血清和尿液样品）
混合6.5体积的1×样品提取液和3.5体积的100%乙醇。
9．样品的准备
1）饲料（稀释倍数：10.0）
- 取适当样品加入5倍70%乙醇（如1g样品＋5mL70%乙醇），匀浆器匀浆；
- 取1.5g匀浆样品，室温下4000g离心5分钟；
- 移取0.5mL上清液到另一试管，加入0.5mL1×样品提取液混合均匀；
- 每孔取50μL作检测。
2）肌肉/肝脏/肾脏（稀释倍数：10.0）
- 除去肌肉， 肝或肾脏样品的脂肪洗净切碎，取适当的匀浆器匀浆；
- 取1g匀浆样品，加入4mL70%乙醇；
- zui大转速漩涡振荡10分钟；
- 室温下4000g离心5分钟；
- 移取0.5mL上清液到另一试管，加入0.5mL1×样品提取液，混合均匀，每孔取50μL作检测。
3）牛奶（稀释倍数：20）
- 对于无脂牛奶，取35%乙醇/样品提取液作稀释（1：19）（如50μL牛奶+950μL提取复溶液）。每孔取50μL稀释样品作检测；
- 对于含脂牛奶，4000g离心5分钟，除去上层脂肪层，取35%乙醇/样品提取液作稀释（1：19）（如50μL牛奶+950μL提取液）。每孔取50μL稀释样品作检测。
4）血清（稀释倍数：20）
- 取0.5mL在4000g离心5分钟；
- 取上清液50 mL，加入0.95mL35%乙醇/样品提取液，混合均匀；
- 每孔取50 mL上述溶液进行检测。
5）尿样（稀释倍数：10）
- 取0.5mL尿液4000g离心5分钟；
- 取0.05mL上清液，加入0.45mL35%乙醇/样品提取液，每孔取50μL作检测。以上资料仅供参考.试剂盒产品详细说明书随货附送。齐一生物科技欢迎您订购咨询.手机.web：www.qiyibio。。ｃｏｍ
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