闪晶生物地理位置图,点击放大!控制污染的方法主要有两种：
1 、在 PCR 实验过程中使用良好的实验步骤和实验环境减少残余污染：使用抗气雾剂移液管的阻止气雾剂进入 eppendorf 管内；为 PCR 样品配制和扩增后分析设计隔离的区域；在准备新反应前更换手套；总是使用不含有模板的阴性对照检测污染；使用预先混合的反应成分，而不是每个反应的每个试剂单独加入。
• 使用尿嘧啶DNA糖基化酶（UDG酶），这种酶（也称为尿嘧啶 -N- 糖基化酶或UNG酶）移除 DNA 中的尿嘧啶，在 PCR 反应液配制时，将dUTP和dTTP 按一定的比例混用，使得扩增产物含有脱氧尿嘧啶，这种产物对 UNG 敏感，所有可以在 PCR 前对新配制的反应用 UNG 处理以破坏残余产物，杜绝污染。
UNG酶特征
• 克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后，再经三次过柱纯化分离出来的重组蛋白。
• 50ul 体系中，加入 0.1U 的 UNG 酶，能够消除 10 7 带有 dUTP 的、大于 6 个碱基的双链 DNA 污染。
• 反应条件： 37 ℃ ， 2 分钟；反应 buffer: 20mM Tris-HCl(PH:8.0); 1mM EDTA; 1mM DTT 。
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