英文名称：Fmoc-Cys(tert-butoxycarnylpropyl)-OH
CAS号：102971-73-3
别名：(R)-Fmoc-2-amino-3-(3-tert-butoxycarbonyl-propylsulfanyl)-propionic acid
(R)-FMOC-2-AMINO-3-(3-TERT-BUTOXYCARBONYL-PROPYLSULFANYL)PROPIONIC ACID
4-[(2R)-carboxy-2-(9H-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)ethylsulfanyl]butyric acid tert butyl ester
分子式：C26H31NO6S
分子量：485.5925
结构图：
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Gubin 等［31］通过基因组学和生物信息学分析抗PD-1 和/或抗CTLA-4 治疗荷瘤小鼠肿瘤( d42m1-T3) 中产生的特异性突变蛋白，将其制备成突变型长肽疫苗，研究其抗肿瘤作用。RMA-S 细胞与抗原肽共同孵育，流式细胞术-H-2Kb+ 法评价抗原肽与HLA 分子的结合。质谱鉴定与H-2Kb 结合的抗原肽。疫苗皮下注射免疫雄性129S6 系野生型小鼠，免疫后小鼠脾细胞与抗原肽共同孵育，ELISPOTIFN-γ 法评价抗原肽的细胞免疫原性。以免疫检查点阻断治疗后的TIL 为检测对象，或将5( 6) -二乙酸琥珀酰亚胺酯( 5，6-carboxyfluorescein diacetatesuccinimidylester，CFSE) 标记的辐照灭活性初始小鼠脾细胞与抗原肽融合，
再将其与CD+8 TIL 共同孵育，流式细胞术-抗原肽-H-2Kb 四聚物、TIM-3、LAG3、颗粒酶B、IFN-γ、TNF-α 法评价CD+8 TIL 的抗原特异性和免疫反应效应。利用免疫检查点阻断治疗有效的荷瘤小鼠脾细胞制备CD+8细胞毒T 淋巴细胞( cytotoxic T lymphocyte，CTL) 细胞系，将CTL与IFN-γ 预刺激的辐照灭活性肿瘤细胞共同孵育;或将辐照灭活性初始小鼠脾细胞与抗原肽融合，再将其与CTL 细胞系共同孵育，ELISA-IFN-γ 法评价CTL 的反应效应。肿瘤细胞( d42m1-T3) 皮下注射接种小鼠，建立免疫预防或免疫治疗性体内肿瘤模型，以肿瘤生长( 如肿瘤直径) 、动物存活率( 如Kaplan-Meier 曲线) 为指标，评价疫苗的抗肿瘤效果。结果显示突变肽( mLama4，mAlg8) 是免疫检查点阻断治疗相关的d42m1-T3 肿瘤特异性突变抗原; 抗PD-1 和/或抗CTLA-4 能增强CD +8 T 细胞针对这些突变肽的特异性抗肿瘤反应效应; 合成突变型长肽疫苗可有效预防或治疗小鼠体内d42m1-T3 肿瘤的生长［31］。Martin 等［32］采用全外显子组、转录组测序和MHC I-肽预测性结合算法( 如NetMHCpan 2． 8) 分析小鼠卵巢癌ID8-G7 细胞( 表达大鼠neu 癌基因标记的SIINFEKL 表位) 的突变型抗原肽。将合成突变型长肽皮下注射免疫雌性C57BL /6 小鼠的脾细胞与突变肽或ID8-G7 肿瘤细胞共同孵育，ELISPOTIFN-γ /IL-2 法、流式细胞术-MHC II － ，IFN-γ + ，CD +4 /CD +8 T 细胞法评价突变肽的细胞免疫原性。流式细胞术分离后扩增突变肽特异性4-1BB+OX40+ CD+4 T 细胞，将其与突变肽或ID8-G7 肿瘤细胞共同孵育，ELISPOT-IL-2 法评价T 细胞对ID8-G7 肿瘤细胞的免疫反应。ID8-G7 肿瘤细胞腹腔注射接种雌性MMTV/neuOT-I /OT-II 转基因小鼠( 对SIINFEKL 表位耐受) ，建立免疫预防和免疫治疗性体内肿瘤模型，疫苗皮下注射免疫小鼠，以动物生存时间和生存率为指标，评价合成突变型长肽的体内抗肿瘤效果。结果显示分析得到的17 种合成突变型长肽疫苗中有7 种可诱发较强的新抗原特异性CD +4和/或CD +8 T 细胞反应; 体外新抗原特异性T细胞不能识别ID8-G7 肿瘤细胞; 免疫预防和免疫治疗性体内肿瘤模型中，疫苗不能延长荷瘤小鼠的生存时间; 这可能与卵巢癌的低突变负荷导致其不能产生真正的MHC 表位有关
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