英文名称：D-β-homoleucine.HCl
CAS号：1276055-44-7
别名：(R)-3-Amino-5-methylhexanoic acid hydrochloride
D-beta-homoleucine-HCl
(3R)-3-amino-5-methylhexanoic acid,hydrochloride
分子式：C7H15NO2.HCl
分子量：181.66044
结构图：
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Kuai 等［33］开发了一种以合成高密度脂蛋白纳米材料为抗原肽( 如SIINFEKL、小鼠结肠腺癌MC-38 细胞的Adpgk 基因突变肽) 和佐剂载体的个体化肽疫苗。疫苗与BMDCs 或JAWSII 细胞共同孵育，流式细胞术-抗原肽-HLA+法或细胞溶酶体和细胞核染色的共聚焦显微镜法分析DCs 对抗原肽的递呈。FITC 标记的抗原肽尾基部皮下注射雌性C57BL /6 小鼠，交互式视频信息系统( interactivevideo information system， IVIS) 分析小鼠腹股沟淋巴结对抗原肽的递呈。抗原融合性BMDCs 与抗原特异性B3Z CD+8 T 细胞杂交瘤共同孵育，以氯酚红-β-D-半乳糖苷的吸光度为指标，评价T 细胞的活化。疫苗免疫雌性C57BL /6 小鼠，流式细胞术-抗原肽-HLA 四聚物+ CD+8α T 细胞法分析免疫后小鼠外周血中抗原特异性T 细胞; 同时将免疫后小鼠脾细胞与抗原肽共同孵育，ELISPOT-IFN-γ 法分析抗原肽的细胞免疫原性。疫苗免疫后小鼠脾细胞为效应细胞，MC-38 肿瘤细胞为靶细胞，采用乳酸脱氢酶法( lactic dehydrogenase，LDH) 评价CTL 的细胞毒性。疫苗免疫后雌性C57BL /6 小鼠皮下或静脉注射接种肿瘤细胞( B16OVA) ，建立免疫预防性抗肿瘤生长或转移模型; 或小鼠皮下注射接种肿瘤细胞( MC-38 或B16F10) ，再用疫苗免疫小鼠，建立免疫治疗性抗肿瘤生长模型; 以肿瘤体积和肿瘤肺转移数为指标，评价疫苗的抗肿瘤作用; 流式细胞术-IFN-γ +TNF-α + CD +8α CD +4 T 细胞法检测免疫后小鼠外周血与抗原肽孵育后产生的T 细胞反应和TIL。结果显示DCs 可有效递呈疫苗抗原肽，该疫苗可有效诱导产生T 细胞反应，其诱导产生的新抗原特异性CTL数量为单独可溶性抗原肽疫苗的47 倍; 该疫苗结合抗PD-1 和抗CTLA-4 可有效抑制体内MC-38 和B16F10 肿瘤生长。
Kinkead 等［34］通过全外显子组测序、RNA 测序和MHC-肽预测性结合算法( 如NetMHC) 分析鼠Panc02 细胞系的新抗原，将其制备成肽疫苗( PancVAX)。疫苗后下肢注射免疫雄性C57BL /6 小鼠，分离制备免疫后小鼠脾细胞来源的CD +8 T 细胞，将其与抗原肽融合性T2-Db 或Kb 细胞共同孵育，ELISPOT-IFN-γ 法和流式细胞术-CD3，CD8， IFN-γ，PD-1，颗粒酶B，TNF-α 法评价抗原肽的细胞免疫原性。Panc02 细胞皮下注射小鼠建立免疫治疗性体内肿瘤模型，疫苗尾基部皮下注射免疫小鼠，分离制备治疗后CD +8 TIL，将其与抗原肽融合性T2-Db 或Kb 细胞共同孵育，采用ELISPOT-IFN-γ 法和流式细胞术-CD3，CD8， IFN-γ，PD-1 法评价抗原肽的细胞免疫原性; 采用Kaplan-Meier 曲线、肿瘤生长曲线评价疫苗抗肿瘤作用，流式细胞术-CD3，CD8，T-bet，PD1，Tim3，Lag3 法评价TIL 功能。结果显示该疫苗可有效激活抗原肽特异性T 细胞，并可引起小鼠体内移植瘤的消退; 其联合2 种检查点调节剂( 抗PD-1 和OX40 抗体) 可引起更强且持久的肿瘤消退并提高生存率［34］。
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