英文名称:Fmoc-β-HomoGln(trt)-OH
CAS号:401915-55-7
别名:(s)-3-(fmoc-amino)-n-trityl-adipic acid 6-amide
L-3-(Fmoc-amino)-N-trityladipic acid 6-amide
Fmoc-β-Homogln(Trt)-OH
(3S)-3-(9H-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-6-oxo-6-(tritylamino)hexanoic acid
分子式:C40H36N2O5
分子量:624.72424
结构图:
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LC-MS 肽图分析
肽图酶解: 取 100 μg( 5 μg·μL-1) 蛋白加入 74 μL 8 mol·L-1盐酸胍,5 μL 1 mol·L-1Tris-HCl( pH 7. 6) ,1 μL 1 mol·L-1DTT,充分涡旋震荡混匀,37 ℃ 水浴 60 min 后,冷却至室温,加入 2 μL 1 mol·L-1碘乙酰胺,室温避光30 min,使用 ZebaTMSpin 脱盐柱进行溶液置换成 50mmol·L-1Tris-HCl( pH 7. 6) ,终体积近 100 μL,加 入 2. 5 μg 胰蛋白酶,37 ℃酶解 4 h 后,加入 1 μL 纯甲酸终止酶解,进行后续液相质谱分析。
色谱柱为AccucoreTMC18 色谱柱 ( 2. 1 mm × 150 mm,ThermoFisher 公司) ,色谱条件为柱温 45 ℃,样品盘温度 8 ℃,进样量 20 μg。
流动相 A 为 0. 1% FA-H2O,流动 相 B 为 0. 1% FA-ACN,梯 度 为 0 ~ 5 min,1% B;5 ~ 48 min,1% ~ 40% B; 48 ~ 50 min,40% ~ 90% B;50 ~ 60 min,90% B; 60 ~ 61 min,90% ~ 1% B; 61 ~70 min,1% B,流速为 0. 25 mL·min-1。
Q ExactivePlus 高分辨质谱仪,正离子扫描模式,数据依赖型扫描方法( data dependent acquisition) ,一级分辨率为70 000,扫描范围 m / z 200 ~ 2 000,AGC target 3e6 ; 二级 扫 描 参 数: 分 辨 率 35 00,AGC target 1e5, ,First Mass: m / z 120,四极杆隔离窗口 m / z1. 8,碎裂能量 NCE 28。