501高效液相色谱测定水样中的苯酚
仪器和试剂
1、仪器：
⑴STI501液相色谱仪梯度系统：
①流动相：乙腈、MQ水（由铝箔纸包裹，防止其中产生藻类，堵塞进口）
②高压输液泵：并联式微体积柱塞往复泵
型号：P501
厂家：Science
③色谱柱：固定相填充物：十八碳（C18）
型号：Vertex C18
参数： 填充物粒径：5 μm 内径×长度：4.6×250 mm
④检测器：紫外检测器（UV）
型号：UV-501 电压：230-210V
厂家：Science
⑤超声波清洗装置： 型号：SX-01
⑥进样装置：高压六通进样阀
两个状态： Load：样品进入六通阀，未入色谱柱 Inject：位于六通阀的样品进入色谱柱
⑦淋洗液（洗针、洗阀）：甲醇
⑵移液管 2 mL、5 mL各一支
⑶具塞离心管10 mL三支、1.5 mL一次性离心管一支
2. 试剂：甲醇（色谱纯）； 苯酚标准使用溶液（10 mg/L）
待测水样。
实验步骤
1 标准系列配制
取苯酚标准使用液0.50、1.00、2.00 mL于10 mL的具塞离心管中，用甲醇定容至5 mL，混匀。待测。
2 样品的制备
取水样约1 mL于1.5 mL一次性离心管中。待测。
3 色谱参数
色谱柱：C18 柱；
流动相：乙腈、水；
梯度洗脱程序：
洗脱时间 | 0:00 | 4:00 | 4:01 | 5:00 | 5:01 | 8:00 |
乙腈（%） | 65 | 65 | 75 | 75 | 65 | 65 |
流速：1.0 mL/min；
柱温：室温；
进样量：20 μL；
检测器：紫外检测器，检测波长280 nm
测定
测定标准系列，再测定样品。根据标准系列中苯酚的保留时间，定性确定样品中的目标物。
记录标准系列和样品中目标物的峰面积。
数据记录与计算
（1）标准系列c=4mg/mL的谱图及样品的谱图：
样品谱图（图2）中，三个明显高的峰的记录数据如下表
表1 样品的谱图中三个峰的特征数据
保留时间（t/min） | 色谱峰面积/counts | 色谱峰高/mAU | |
个峰 | 3.892 | 22907 | 2928 |
第二个峰 | 4.307 | 182.47 | |
第三个峰 | 4.879 | 20567 |
图1 标准系列c=4mg/mL的谱图
图2 样品的谱图
2. 标准系列和样品中苯酚的保留时间、峰面积、峰高等实验数据：
表2 标准系列和样品中苯酚的谱图峰的特征数据
标准样品体积/mL | 保留时间t/min | 色谱峰面积/counts | 色谱峰高/mAU | 浓度/(mg/mL) | |
1 | 0.5 | 3.951 | 17640 | 1209 | 1.0 |
2 | 1.0 | 3.837 | 34754 | 2963 | 2.0 |
3 | 2.0 | 3.773 | 66625 | 5258 | 4.0 |
样品 | － | 3.892 | 22907 | 2928 | 1.3 |
参考文献：
关键词：苯酚，高效液相色谱法，501液相色谱仪
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